Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

ПРОВЕДЕНИЕ ИСПЫТАНИЯ

Специфический антитоксин в концентрации 100 МЕ или Lf-eq. в 1 мл

вносят  в  возрастающих  объемах  (количествах  МЕ/мл)  в  ряд  пробирок,
содержащих  равные  объемы  испытуемого  раствора  токсина/анатоксина.
Содержимое каждой пробирки доводят до равного объема 0,9 % раствором
натрия хлорида. Смеси перемешивают, избегая образования пены. Пробирки
со  смесями  инкубируют  на  водяной  бане  при  температуре  45–50  ºС,
периодически оценивая состояние растворов.

Результат реакции оценивают в проходящем свете, при необходимости

применяют лупу. Отмечают пробирки, в которых раньше других произошла
флокуляция,  и  время  наступления  флокуляции  (Kf).  Пробирка,  в  которой
раньше  других  наблюдается  появление  хлопьев  (инициальная  флокуляция),
содержит эквивалентные или близкие к эквивалентным количества антигена
и  антител.  Для  расчета  содержания  антигена  учитывают  концентрацию
антитоксина  в  этой  пробирке.  Если  инициальная  флокуляция  наблюдается
одновременно  в  2  пробирках,  для  расчета  берут  среднее  значение
показателей  концентрации  антитоксина,  содержащегося  в  этих  пробирках.
Если  перед  проведением  реакции  флокуляции  испытуемый  раствор  был
разведен,  то  для  расчета  содержания  анатоксина  в  растворе  полученный
результат умножают на степень разведения.

Показатель (Кf) является полезным индикатором качества антигена.

Если  при  данных  значениях  температуры  и  концентраций  анатоксина  и
антитоксина  значение  Кf  при  повторных  испытаниях  увеличивается  по
сравнению  с  наблюдавшимся  ранее,  это  может  свидетельствовать  о
разрушении антигена и снижении его иммуногенной активности.

Определение содержания анатоксина в испытуемом образце

представлено в табл.