Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 1

После каждого взятия крови пробы центрифугируют в течение 5 мин

при  температуре  5°С  и  при  величине  относительного  центробежного
ускорения  (ОЦУ),  равной  1500  g  (Примечание  3).  От  каждой  пробы
отбирают,  например,  по  10  мкл  плазмы  и  переносят  в  микрокювету
плоскодонного  96-луночного  планшета,  который  можно  хранить  при
температуре от 6 до 8°С до окончания испытания.

Перед определением концентрации глюкозы в каждую микрокювету с

плазмой добавляют по 240 мкл готового энзимо-хромогенного набора,
например, реактива «GLUCOSE Liquicolor» или аналогичного. Планшеты
инкубируют при температуре (37 ± 1)

С не менее 20 мин.

Измерение оптической плотности проводят при длине волны 492 нм.

В качестве раствора сравнения используют стандартный раствор глюкозы с
концентрацией 5,55 ммоль/л (100 мг %), входящий в состав готового энзимо-
хромогенного набора.

Концентрацию глюкозы (с) в крови рассчитывают по формуле:

∗

100

мг

где

А - оптическая плотность пробы;
А

- оптическая плотность глюкозы в растворе сравнения.

Примечание 1

Приготовление основных растворов СО и ИО инсулина или его аналога.

Навеску СО инсулина растворяют в 0,2 мл 0,1 М раствора

хлористоводородной кислоты до полного растворения субстанции, а затем

добавляют растворитель для получения раствора с концентрацией инсулина

100 МЕ/мл. В качестве растворителя используют 0,1 М раствор кислоты

хлористоводородной, разведенной в 33,3 раза раствором натрия хлорида

0,9% для инъекций.

Основной раствор следует хранить при температуре от 2 до 8°С.

Замораживание не допускается. Раствор должен быть прозрачным.

При определении биологической активности субстанции инсулина

основной раствор готовят таким же образом, что и основной раствор СО.

Разведение субстанции проводят, исходя из величины биологической

активности инсулина с учетом фактического содержания влаги.