При обнаружении роста в бульоне бактериологической петлей делают
пересев на агар Мак-Конки или среду № 4. Посевы инкубируют в течение
18 – 48 ч (агар Мак-Конки) или 18 – 24 ч (среда № 4) в стандартных
условиях. Если после инкубации на плотных питательных средах выявлены
колонии, типичные для
E. coli
(табл. 7), их микроскопируют. При
обнаружении в мазках мелких грамотрицательных палочек отдельные
типичные колонии пересевают в пробирки на скошенный соево-казеиновый
агар или среду № 1 и инкубируют в течение 18 – 24 ч для накопления чистой
культуры микроорганизма.
Для идентификации выделенных бактерий используют биохимические
тесты на цитохромоксидазу (п.8.1), индол (п.8.2) и способность
утилизировать натрия цитрат. Для этого из пробирок с чистой культурой
делают пересевы на агар Симмонса (или среду № 14) и соево-казеиновый
бульон. Через 18 – 24 ч инкубации отмечают рост бактерий или его
отсутствие на агаре Симмонса (или среде № 14). Утилизацию цитрата
устанавливают по смещению рН среды в щелочную сторону (изменению
цвета среды с зеленого на синий). Наличие индола определяют по появлению
красного кольца на поверхности соево-казеинового бульона (или среды №
15) при добавлении реактива Ковача.
Если в ходе исследования обнаруживают типичные грамотрицательные
палочки, не содержащие фермент цитохромоксидазу, не утилизирующие
натрия цитрат и образующие индол, считают, что ЛС контаминировано
бактериями
E. coli
.
6.2.2. Количественное определение бактерий E. coli
Количественное определение
E.coli
проводят так же, как и
количественное определение энтеробактерий, устойчивых к желчи (п. 6.1.2),
делая пересев из гомогената А в пробирки с бульоном Мак-Конки (или
средой № 3). При обнаружении роста в пробирках (табл. 7) из каждой
пробирки делают пересев бактериологической петлей на агар Мак-Конки или
среду № 4. Посевы инкубируют в стандартных условиях в течение 18 – 48 ч
(агар Мак-Конки) или 18 – 24 ч (среда № 4).
Предыдущая < | 1160 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF