Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 1

Lactobacillus plantarum

ВКМ В-578 (АТСС 8014) используют

для

определения D-биотина, кальция пантотената и кислоты никотиновой (или
никотинамида);

Enteroccocus faecalis

(

E. faecium

) ВКМ В-602 применяют для

определения фолиевой кислоты.

Выполнение испытания

Точную навеску порошка растертых драже или таблеток, указанную в

соответствующих фармакопейных статьях или в нормативной документации,
количественно переносят водой в мерную колбу определенной вместимости,
доводят объем раствора водой очищенной до метки, перемешивают и
фильтруют (основной раствор).

Готовят растворы рабочих стандартных и испытуемых образцов. Для

этого  в  2–3  ряда  пробирок  одинакового  размера  разливают  по  1  мл
свежеприготовленной  воды  очищенной.  Образцы  в  количестве  1  мл  с
концентрацией  D-биотина  около  0,002  мкг/мл,  кальция  пантотената  –  0,2
мкг/мл,  фолиевой  кислоты  –  0,004  мкг/мл,  никотиновой  кислоты  (или
никотинамида)  –  0,32  мкг/мл  вносят  в  первые  пробирки  соответствующих
рядов и делают 6 последовательных разведений в каждом ряду, перемешивая
и перенося 1мл

раствора в следующие пробирки ряда; из последней отбирают

1 мл и удаляют в дезинфицирующий раствор. Затем во все пробирки
добавляют по 1 мл основной среды. При этом общий объем полученных
растворов в каждой пробирке должен быть равен 2 мл.

В каждом ряду ставят отрицательный контроль, содержащий 1 мл воды

очищенной и 1 мл

основной среды.

Все пробирки стерилизуют насыщенным паром под давлением в

паровом стерилизаторе при температуре 120 – 121

С в течение 10–15 мин.

После охлаждения в каждую пробирку вносят по 0,1 мл разведенной взвеси
тест-культуры (п.5).

Засеянные пробирки инкубируют при температуре (32,5±2,5)

С в

течение 16–24 ч. Интенсивность роста тест-культуры в пробирках