•

 

раствор рибофлавина

 з)

   

 

 

 

                      8 мл

 

 

•

 

раствор пиридоксина и ПАБК

 ф)

 

 

 

                      2 мл 

•

 

раствор биотина

 у)

   

 

 

 

                               4 мл  

•

 

растворы солей А

к

)

 и солей Б

л)

  

 

                        по 10 мл 

•

 

вода очищенная    

 

 

 

                   до 1000 мл 

рН (6,8 ± 0,2)  
5. 

Приготовление  питательных  сред  для  определения  содержания 

витаминов.

  Глюкозу  предварительно  обрабатывают  углем  активированным 

осветляющим.  Для  этого  к  200  мл

 

20  %  раствора  глюкозы  добавляют  10  г

 

угля, встряхивают в течение 40 мин

 

и фильтруют через плотный бумажный 

фильтр. К раствору глюкозы добавляют остальные растворы, устанавливают 

рН 6,8 и доводят объем среды водой очищенной до 1000 мл. Среду нагревают 

на кипящей  водяной бане 5  мин

, 

охлаждают  и  фильтруют  через бумажный 

фильтр. Готовую среду разливают по 70 мл в колбы вместимостью 100 мл, 

закрывают и хранят в морозильной камере при температуре минус 18 – 25 

0 

С 

в течение 3 мес. Перед использованием среду размораживают при комнатной 

температуре. 

Приготовление посевного материала  

Для  приготовления  посевного  материала  используют  один  из 

нижеприведенных способов: 

1)  За  1  сут  до  испытания  тест-микроорганизм  пересевают  на 

питательную  среду  соответствующего  состава  (п.3)  и  инкубируют  при 

температуре  (32,5  ±  2,5) 

о

С  в  течение  16  –  24  ч

. 

Клетки  отделяют 

центрифугированием  в  асептических  условиях,  надосадочную  жидкость 

сливают,  а  осадок  суспендируют  в  10  мл  стерильного  раствора  натрия 

хлорида

х)

.  Вносят  0,05  мл

 

полученной  суспензии  в  10  мл  стерильного 

изотонического раствора натрия хлорида. Мутность используемой суспензии 

должна быть (90 ± 1) % по шкале светопропускания фотометра-нефелометра 

при длине волны около 540 нм. 

2)  При  определении  D-биотина,  кальция  пантотената  и  никотиновой 

кислоты  (или  никотинамида)  за  1сут  до  испытания  небольшое  количество 

исходной  тест-культуры 

L.plantarum

  ВКМ  В-758  (АТСС  8014)  пересевают 

бактериологической  петлей  на  агаризованную  среду  для  лактобактерий 

(п.3.1). Инкубируют при температуре (32,5 ± 2,5) 

0

С в течение 16–24 ч. После 

этого  культуру  смывают  стерильным  раствором  натрия  хлорида  и  доводят 

содержание  микробных  клеток  до  10

9 

КОЕ/мл  по  оптическому  стандарту 

мутности. Затем переносят 0,2 мл взвеси в пробирку с 9,0 мл раствора натрия 

хлорида,  перемешивают  и  используют  в  качестве  посевного  материала  для 

внесения в основную питательную среду (пп. 4.1, 4.2 и 4.4). 

Enteroccocus  faecalis (faecium) 

ВКМ  В-602  пересевают  в  жидкую 

питательную среду следующего состава: 

 

Предыдущая <  | 1320  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF