наличии 2 ионогенных групп в активном центре фермента, приведена на рис.
4.
Рисунок 4 – Зависимость начальной скорости реакции
υ
0
от значения рН
Определение активности следует проводить при оптимальном значении
рН, определенном при выбранных значениях концентрации фермента и
насыщающей концентрации субстрата; использовании буферного раствора
того состава, который не ингибирует фермент и температуре (37 ± 0,1) ºС,
если нет других указаний в фармакопейной статье.
После выбора оптимального значения рН необходимо проверить,
сохраняется ли при этом рН линейная зависимость [
P
] от
t
при выбранных
значениях концентрации фермента и насыщающей концентрации субстрата.
6.
Кофакторы.
Существуют
ферменты,
для
проявления
каталитических свойств которых необходимо присутствие кофакторов –
веществ, с помощью которых происходит активация ферментов.
Кофакторами могут выступать один или несколько неорганических ионов,
таких как Fe
2+
, Mn
2+
, Mg
2+
, Zn
2+
или комплексная органическая или
металлорганическая молекула, называемая коферментом.
Для определения оптимальной концентрации кофактора следует
построить кривую зависимости начальной скорости реакции от начальной
концентрации кофактора, аналогичную зависимости начальной скорости
pH
опт
pH
Предыдущая < | 1331 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF