Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 1

реакции от начальной концентрации субстрата, и по этой кривой выбрать
насыщающую концентрацию кофактора.

После выбора насыщающей концентрации кофактора необходимо

проверить, сохраняется ли при ней линейная зависимость [

] от

Конкретные параметры ферментативной реакции указываются в

фармакопейных статьях.

Способы детекции

Для количественной регистрации скорости ферментативной реакции

используют

спектрофотометрические,

флюресцентные,

хеми-

биолюминесцентные  методы  детекции,  основанные  на  спектральных
свойствах  субстрата  или  продукта  реакции,  а  также  детекцию  с  помощью
микрокалориметрических  датчиков  и  биодатчиков  (биосенсоров)  на  основе
хеми-  и  биолюминесценции;  электрохимические  методы,  такие  как
потенциометрия,  амперометрия  и  др.  Для  одних  видов  анализа  детекция
может  проводиться  непрерывно  в  ходе  реакции,  для  других  –  после  ее
остановки.

Способ остановки ферментативной реакции должен быть указан в

фармакопейной статье.

Единицы измерения ферментативной активности

Активность

фермента

измеряется

количеством

субстрата,

преобразованного в продукт в единицу времени, и выражается в
Международных единицах (МЕ) или единицах действия (ЕД).

МЕ – это такое количество фермента, которое при заданных условиях

катализирует превращение одного микромоля субстрата за 1 мин (или одного
микроэквивалента затронутых реакцией групп в тех случаях, когда атакуется
более одной группы в каждой молекуле субстрата).

ЕД – это условная единица активности фермента, величина которой

указывается в фармакопейной статье.