ОФС.1.2.1.0023.15 Электрофорез в полиакриламидном геле

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Электрофорез

ОФС.1.2.1.0023.15

в полиакриламидном геле

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на метод

молекулярной  биологии  и  биохимии  –  электрофорез  в  полиакриламидном
геле  (ПААГ),  используемый  для  разделения  белков  и  нуклеиновых  кислот,
который  основан  на  движении  заряженных  биологических  макромолекул  в
постоянном  электрическом  поле.  Разделение  в  полиакриламидном  геле
происходит  за  счёт  различий  заряда  разделяемых  молекул  и  отличий
молекулярных  масс,  а  также  в  зависимости  от  конфигурации  молекул.
Изменяя  концентрацию  полимера,  можно  получать  гели  с  широким
диапазоном  размеров  пор,  позволяющих  проводить  разделение  белков  и
пептидов с молекулярными массами от 2 до 300 кДа. Можно также изменять
электрический заряд макромолекул (путем вариации рН буферного раствора)
и  их  конформацию  за  счет  введения  в  буферный  раствор  денатурирующих
агентов или детергентов.

Протекание через жидкость электрического тока неизбежно связано с

выделением тепла, поэтому следует обеспечивать теплоотвод и стабильность
температурного режима с целью исключения изменений вязкости,
проводимости и скорости потока и, следовательно, искажения зон
анализируемых компонентов.

Для наблюдения за процессом в исходный препарат добавляют

краситель, молекулы которого несут электрический заряд того же знака, что
и фракционируемые молекулы, но не взаимодействуют с ними, причем