испарения жидкости.
Сборку прибора и его очистку после использования проводят в
соответствии с инструкцией производителя.
Перед заливкой геля основание и боковые стороны ячейки закрывают
подходящими прокладками, толщина которых определяет толщину рабочего
геля (при этом после полимеризации геля прокладку в основании убирают).
Ячейку заполняют раствором мономера с поперечно-сшивающим агентом и
катализатором. Растворы должны быть дегазированы перед полимеризацией
и гели должны использоваться свежеприготовленными. Заливку растворов
проводят таким образом, чтобы исключить попадание внутрь ячейки
пузырьков воздуха.
Гребенку, имеющую зубцы соответствующего размера (в зависимости
от объемов наносимого образца), устанавливают в верхнюю часть ячейки на
разделяющий гель и оставляют там до окончания полимеризации геля.
Формирование геля обычно занимает не менее 30 мин и может считаться
законченным, когда между гелем и водным слоем появляется четкая граница.
После удаления гребенки из геля, прошедшего полимеризацию, остается ряд
лунок.
Заполняют нижний и верхний резервуары камеры предписанным
электродным буферным раствором. Готовят испытуемый и стандартный
растворы, содержащие краситель и сахарозу или другой плотный и вязкий
растворитель. Наносят образцы шприцем или микропипеткой в основания
лунок, сразу включают электрический ток и начинают электрофорез,
соблюдая предписанные условия (температуру и величину напряжения).
После окончания процесса (когда краситель достигает нижней границы
пластины) ток выключают, пластину удаляют из камеры, зоны фиксируют,
окрашивают и при необходимости пластину высушивают.
Подготовка полиакриламидного геля для вертикального электрофореза
с SDS в неоднородной буферной системе
Сначала готовят и заливают в подготовленную ячейку нижний
Предыдущая < | 657 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF