достаточно интенсивное в коротковолновой области вплоть до 200 нм;
- лазеры, излучающие свет высокой интенсивности в очень узком
интервале длин волн (не более 0,01 нм) и позволяющие благодаря этому не
использовать монохроматоры или первичные светофильтры;
- светодиоды и светодиодные матрицы, излучающие свет в определённых
диапазонах длин волн.
Для размещения анализируемых проб в флуориметрах используют, как
правило, прямоугольные кварцевые кюветы, отполированные со всех 4
вертикальных сторон, иногда – цилиндрические кюветы или пробирки. Обычно
объем испытуемых образцов составляет 2 – 3 мл, но к некоторым приборам
прилагаются кюветы вместимостью от 100 до 300 мкл или капиллярные
держатели для еще меньшего объема.
Измерение флуоресценции.
Флуоресценцию определяют в растворах с
концентрацией от 10
-5
М и менее, в диапазоне, для которого наблюдается
прямая зависимость интенсивности флуоресценции от концентрации. При более
высоких концентрациях всё более значительная часть поступающего света
абсорбируется образцом вблизи поверхности кюветы, и линейная зависимость
величины сигнала от концентрации определяемого вещества нарушается.
Все
замеры
интенсивности
флуоресценции
должны
быть
скорректированы с растворителем.
Интенсивность флуоресценции зависит от:
-
температуры,
-
растворителя,
-
величины рН испытуемого раствора,
-
присутствия в растворе посторонних частиц,
-
концентрации кислорода в испытуемом растворе,
-
постороннего освещения.
Эффективность флуоресценции обратно пропорциональна температуре.
Предыдущая < | 780 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF