background image

среду

не содержащую субстанций, которые могут осаждаться

 

цетилтримети-

ламмония

 

бромидом, а

 

также

 

не содержащую элементов крови или высоко-

молекулярных полисахаридов.

 

Бактериологическая чистота полученной биомассы должна оценивать-

ся и подтверждаться методами, применяемыми для оценки чистоты штамма

-

продуцента. 

 

Бактериальный  сбор  центрифугируют  и  осаждают  полисахарид  из 

надосадочной жидкости добавлением цетилтриметиламмония бромида до его 
конечной концентрации 0,01 %, после чего следует экстракция полисахарида 
из цетавлон

-

полисахаридного комплекса раствором кальция хлорида. Полу-

ченный полисахарид хранят при температуре минус 20 °С. 

 

Субстанцией полисахаридной менингококковой вакцины серогруппы А 

является полисахарид, очищенный от нуклеиновых кислот, белка и липопо-
лисахарида  путем  ступенчатого  фракционирования  этанолом  и  экстракцией

 

фенолом. Очищенную субстанцию сушат в эксикаторе до постоянной

 

массы

 

над

 

прокаленным

 

кальция хлоридом и хранят при температуре минус 

20 °

С.

  

На стадии производства субстанцию испытывают по следующим пока-

зателям

Подлинность.

 

Субстанция  должна  тормозить  реакцию  пассивной  ге-

магглютинации (положительная РТПГА) в гомологичной «А» системе в кон-
центрации

не  превышающей  0,4  мкг  полисахарида  в  1  мл

при  отсутствии 

тормозящего эффекта в гетерологичной «С» системе с содержанием полиса-
харида 50 мкг

/

мл

 (

см. подраздел «Подлинность» раздела «Испытания»).

 

Белок.

 

Не  более  1  %.  Определение  проводят  по  методу  Лоури  без 

предварительного  осаждения  белка  в  соответствии  с  ОФС  «Определение 
белка

 

колориметрическим  методом  (метод  Лоури)  в  биологических  лекар-

ственных препаратах». Субстанцию предварительно растворяют в воде очи-
щенной до концентрации 5 мг/мл.

 

Нуклеиновые кислоты.

 

Не более 1 %. Определение проводят в соот-

ветствии  с  ОФС  «Определение  нуклеиновых  кислот  по  методу  Спирина

 

в 

5290