Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

В центрифужную пробирку отбирают 1 или 2 мл испытуемого

раствора, тщательно перемешанного на вихревой мешалке, центрифугируют
при температуре 4-5

С при 3500 об/мин в течение 30 мин. Надосадочную

жидкость удаляют, осадок промывают 2 мл воды очищенной и вновь
центрифугируют в тех же условиях, после чего надосадочную жидкость
вновь сливают.

К осадку прибавляют 1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида,

перемешивают,  выдерживают  30  мин  при  комнатной  температуре,  затем
прибавляют  5  мл  реактива  В  и  снова  перемешивают.  Через  10  мин
прибавляют  0,5  мл  фосфорномолибденово-вольфрамового  реактива.  Смесь
перемешивают и центрифугируют при температуре 4 - 5

С при 3500 об/мин

в  течение 20  мин. Надосадочную  жидкость сливают  в  пробирку  и  через 10
мин  измеряют  оптическую  плотность  по  методике,  указанной  в  ОФС
«Определение белка» (метод Лоури, метод А).

В качестве контрольного раствора используют 1 или 2 мл воды

очищенной или буферного раствора, указанного в фармакопейной статье или
нормативной документации, прибавляют 1 мл 0,1 М раствора натрия
гидроксида, 5 мл реактива В и 0,5 мл фосфорномолибденово-вольфрамового
реактива.

Содержания белка рассчитывают по калибровочному графику, как

указано в методе I. Калибровочный график воспроизводят при каждом
определении.

Примечания
Испытуемый раствор. 1 мл испытуемого раствора, содержащего от

0,04 до 0,16 мг/мл белка или 2 мл испытуемого раствора, содержащего

от 0,02 мг/мл до 0,04 мг/мл белка.

Приготовление стандартного раствора – указано в методе I.

Метод IV (для сорбированных препаратов c содержанием белка

0,01 - 0,02 мг/мл)