Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

нормативной документации. Выбор способа постановки ИФА зависит от
природы исследуемого вещества и его количества, так как разные виды ИФА
обладают различной чувствительностью. Для оценки качества веществ,
содержащих

антитела,

возможно

использование

специфичных

антиидиотипических антител.

Неконкуретный метод ИФА

Неконкурентный метод ИФА подразделяется на несколько видов по

типу детекции (прямой конкурентный, косвенный (непрямой) конкурентный)
и по типу иммобилизованного на твердой фазе вещества (антиген или
антитело).

Прямой вариант ИФА

Может выполняться 2 способами. В первом случае исследуемое

вещество (антиген) непосредственно иммобилизовано на твердой фазе; тогда
связавшееся  с  антигеном  меченое  антитело  является  детектором.  При
выполнении  теста  иным  способом  используют  иммобилизованные  на
твердой  фазе  антитела.  В  этом  случае  детектором  является  исследуемое
вещество, меченное ферментом.

Косвенный (непрямой) вариант ИФА

При выполнении непрямого варианта ИФА антиген иммобилизован на

твердой  фазе.  После  блокировки  к  антигену  прибавляют  раствор
специфических к нему антител. После инкубации образовавшийся комплекс
антиген–антитело  отмывают  от  несвязавшихся  антител  и  добавляют
меченный ферментом анти-иммуноглобулин (анти-Ig), выступающий в роли
детектора.  Анти-Ig  детекторы  коммерчески  доступны  для  конкретных
классов  и  подклассов  Ig,  что  делает  этот  формат  анализа  удобным  для
изотипирования  антител.  Кроме  того,  использование  меченого  анти-Ig
усиливает  сигнал  по  сравнению  с  прямым  методом  иммуноферментного
анализа, тем самым увеличивая чувствительность анализа.

Метод «сэндвича» как вариант постановки ИФА