Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

отличающиеся техническим исполнением позволяющих отсекать вещества с
различной молекулярной массой: гельфильтрация (обессоливание), например
с использованием таких сорбентов как сефадекс, диффузия
низкомолекулярных соединений через полупроницаемую мембрану (диализ)
и ультрафильтрация с использованием фильтров, снабжённых мембранами с
различным

размером

пор

из

восстановленной

целлюлозы,

полиэфирсульфона, ацетата целлюлозы, нейлона.

Наиболее типичными реагентами, входящими в состав буферных

растворов, используемых в ходе пробоподготовки являются ACES-буферный
раствор,

три(гидроксиметил)-аминометан,

гидроксиламин,

этилдиаминотетрауксусная кислота и др.

Подготовка белка с использованием перечисленных методов

проводится до этапа расщепления пептидных связей и пептидного
картирования.

Подробное описание процедур выделения и очистки белка приводится

в нормативной документации.

Избирательное расщепление пептидных связей

Выбор метода расщепления пептидных связей зависит от

анализируемого  белка.  Процедура  выбора  включает  определение
требующегося  типа  расщепления  (химического  или  ферментативного),  а
также  типа  протеолитического  реагента  в  рамках  выбранной  категории.  В
таблице 1 приводится ряд протеолитических реагентов и их специфичность в
отношении пептидных связей. Помимо указанных, могут быть использованы
другие реагенты, способные расщеплять пептидные связи.

Таблица 1.

Примеры реагентов для расщепления пептидных связей