Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

Метод электрофореза ДНК
в агарозном геле

ОФС.1.7.2.0039.18

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на метод

электрофореза ДНК в агарозном геле, предназначенный для определения
размеров фрагментов ДНК, а также для их разделения по размеру.

Метод электрофореза ДНК в агарозном геле представляет собой

разновидность зонального электрофореза, описанного в ОФС «Электрофорез».

Сущность метода заключается в том, что молекулы/фрагменты ДНК,

заряженные отрицательно, под действием силы электрического поля движутся
от  отрицательного  электрода  −  катода  («-»)  к  положительному  электроду  −
аноду  («+»).  Агарозный  гель,  являясь  вязкой  средой,  препятствует
продвижению  молекул/фрагментов  -  образцов  ДНК,  в  связи  с  этим,  короткие
фрагменты  ДНК  движутся  к  аноду  быстрее,  чем  длинные.  Отношение
величины  заряда  нуклеиновых  кислот,  мало  зависящей  от  рН  окружающей
среды,  к  их  массе  практически  одинаково,  поэтому  метод  электрофореза  в
агарозном геле позволяет оценить только размеры различных фрагментов ДНК.

После проведения электрофореза проводят визуализацию разделенных

фрагментов и анализ полученных результатов. Возможно также извлечение
фрагментов ДНК из геля для проведения дальнейших исследований.

Методика электрофореза в агарозном геле

Подготовка к проведению анализа