Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

На ровную поверхность устанавливают форму для заливки геля. Не

касаясь дна формы (1-2 мм) помещают гребенки на расстоянии 5 см друг от
друга или как указано в нормативной документации.

Приготовление буферных растворов

Для приготовления буферных растворов обычно используют готовые

составы, входящие в комплекты реагентов для метода электофореза в
агарозном геле.

Для приготовления буферных растворов для электрофореза в агарозном

геле, как правило, используют трис-боратный (ЭДТА, TBE) или трис-ацетатный
(TAE) буферный раствор

в объеме, достаточном для заполнения камеры для

электрофореза и приготовления геля. Возможно использование других
подходящих буферных растворов, которые указывают в нормативной
документации. Буферный раствор для электрофореза, как правило, хранят при
температуре 18 – 25

С в течение 1 нед или при температуре 2 - 8

С в течение 1

мес.

В буферный раствор для образцов добавляют специально подобранный

краситель, а также глицерин или сахарозу, которые указывают в нормативной
документации.  Присутствие  глицерина  или  сахарозы  облегчает  внесение
образцов  в  лунки,  а  краситель  позволяет  в  режиме  реального  времени
наблюдать  продвижение  фронта  образцов  в  геле.  В  качестве  красителей
используют:  бромфеноловый  синий,  ксиленцианол,  крезоловый  красный  или
Orange G. Для каждой концентрации агарозного геля подбирают оптимальный
краситель и его концентрацию.

Приготовление геля

Для приготовления агарозного геля в СВЧ-печи или на водяной бане

расплавляют до прозрачного состояния необходимое количество смеси агарозы,
буферного раствора, не допуская закипания геля. Расплавленную смесь
охлаждают до температуры 50 - 60

С. Далее с помощью автоматического

дозатора добавляют бромистый этидий до конечной концентрации 0,5 мкг/мл,
тщательно перемешивают и смесь тонким слоем (до 5 мм) заливают на