Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

Для отмывания белков, не вступивших в реакцию преципитации,

пластину  с  агаром  помещают  в  кюветы,  заливают  0,9%  раствором  натрия
хлорида  и  выдерживают  в  течение  16-18  ч  при  комнатной  температуре.  За
указанный  период  времени  раствор  меняют  3-4  раза.  Затем  пластину
извлекают  из  0,9%  раствора  натрия  хлорида,  накрывают  фильтровальной
бумагой, смоченной в 0,9% растворе натрия хлорида, не оставляя пузырьков
воздуха и высушивают при комнатной температуре или в сушильном шкафу
при  температуре  не  выше  40°С.  После  высушивания  пластины
фильтровальную бумагу смачивают водой и аккуратно удаляют.

Для окрашивания белков используют краситель амидочерный 10Б или

другой пригодный краситель (в соответствии с указаниями в фармакопейной
статье  или  нормативной  документации),  помещая  пластину  в  кювету  с
красящим раствором на 30-40 мин. Затем пластину промывают несколько раз
в  растворе  для  отмывания  агара  (2%  раствор  уксусной  кислоты  или  иной
раствор,  в  соответствии  с  указаниями  в  нормативной  документации)  в
течение  15-40  мин  до  полного  отсутствия  окрашенного  фона  и  снова
высушивают  при  комнатной  температуре  или  в  сушильном  шкафу  при
температуре не выше 40°С.

Липопротеиды окрашивают суданом черным В. Для окрашивания

полностью  высушенные  пластины  помещают  на  3  ч  в  красящий  раствор,
затем  обесцвечивают  50%  этанолом  до  полного  просветления  фона.
Липопротеиды  окрашиваются  в  темно-синий  цвет.  Следует  проводить
окрашивание  полностью  высушенного  препарата,  так  как  судан  черный  В
нерастворим в воде и окрашивает влажный гель.

Учет результатов при исследовании фракционного состава препаратов

иммуноглобулинов  человека  проводят  визуально  путем  сравнения
электрофореграммы  испытуемого  образца  с  электрофореграммой
контрольного  образца  –  нормальной  сыворотки  крови  человека
(«Стандартный  образец  тест-системы  для  определения  фракционного
(антигенного)  состава  препаратов  из  сыворотки  крови  человека  методом