Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

фактора VIII. Активность в исследуемом образце определяют по
калибровочной кривой с учетом предварительного разведения образца.

Фактор IX

Клоттинговый метод

Определение активности фактора IX проводят с использованием

человеческой плазмы, дефицитной по фактору IX. Источником
фосфолипидов, необходимых для осуществления свертывания, является
АЧТВ-реагент.

Для разведения стандарта и препаратов используют NaCl-

имидазоловый буферный  pH 7,3 с добавлением 0,1% раствора бычьего или
человеческого  альбумина.  Для построения  калибровочного  графика  готовят
серию  последовательных  разведений  стандарта  в  интервале  от  0,3  до  1
МЕ/мл. Препарат разводят до концентрации менее 1 МЕ/мл. Анализируют 3
разведения препарата. Для каждого образца измерение времени свертывания
проводят  минимум  2  раза.  Измерение  проводят  в  течение  1  ч  после
разведения препарата.

Анализ проводят при температуре (37±0,5)°С. В пластиковую пробирку

вносят  100  мкл  плазмы,  дефицитной  по  фактору  IX,  100  мкл  разведения
стандарта  или  препарата  и  100  мкл  АЧТВ-реагента  и  инкубируют  при
температуре  (37± 0,5)°С  в  течение  2  мин. Время свертывания  фиксируют  с
момента  прибавления  к  смеси  100  мкл  предварительно  прогретого  до
температуры (37 ± 0,5) °С 0,025 М раствора кальция хлорида. В зависимости
от  техники  постановки  анализа  объемы  реагентов  могут  варьироваться  в
соответствующей пропорции.

Калибровочный график строят в полулогарифмических координатах.

По логарифмической оси абсцисс откладывают значения активности фактора
IX, по оси ординат – время свертывания соответствующих разведений
стандарта. Активность фактора IX для каждого разведения испытуемого