background image

фактора  VIII.  Активность  в  исследуемом  образце  определяют  по 
калибровочной кривой с учетом предварительного разведения образца. 

 
 

Фактор IX 

1.

 

Клоттинговый метод 

Определение  активности  фактора  IX  проводят  с  использованием 

человеческой  плазмы,  дефицитной  по  фактору  IX.  Источником 
фосфолипидов,  необходимых  для  осуществления  свертывания,  является 
АЧТВ-реагент. 

Для  разведения  стандарта  и  препаратов  используют  NaCl-

имидазоловый буферный  pH 7,3 с добавлением 0,1% раствора бычьего или 
человеческого  альбумина.  Для построения  калибровочного  графика  готовят 
серию  последовательных  разведений  стандарта  в  интервале  от  0,3  до  1 
МЕ/мл. Препарат разводят до концентрации менее 1 МЕ/мл. Анализируют 3 
разведения препарата. Для каждого образца измерение времени свертывания 
проводят  минимум  2  раза.  Измерение  проводят  в  течение  1  ч  после 
разведения препарата. 

Анализ проводят при температуре (37±0,5)°С. В пластиковую пробирку 

вносят  100  мкл  плазмы,  дефицитной  по  фактору  IX,  100  мкл  разведения 
стандарта  или  препарата  и  100  мкл  АЧТВ-реагента  и  инкубируют  при 
температуре  (37± 0,5)°С  в  течение  2  мин. Время свертывания  фиксируют  с 
момента  прибавления  к  смеси  100  мкл  предварительно  прогретого  до 
температуры (37 ± 0,5) °С 0,025 М раствора кальция хлорида. В зависимости 
от  техники  постановки  анализа  объемы  реагентов  могут  варьироваться  в 
соответствующей пропорции. 

Калибровочный  график  строят  в  полулогарифмических  координатах. 

По логарифмической оси абсцисс откладывают значения активности фактора 
IX,  по  оси  ординат  –  время  свертывания  соответствующих  разведений 
стандарта.  Активность  фактора  IX  для  каждого  разведения  испытуемого 

3148