образца  находят  по  калибровочному  графику.  Активность  FIX  (

А

)  в 

исследуемом образце рассчитывают по формуле: 

,

k

A

A

x

⋅

=

 

где 

x

A

−

  активность  соответствующего  разведения  исследуемого  образца, 

найденная по калибровочному графику; 

k

−

 разведение исследуемого образца. 

Фактор X 

1.

 

Клоттинговый метод 

Определение  активности  фактора  X  проводят  с  использованием 

человеческой  плазмы,  дефицитной  по  фактору  X.  Процесс  свертывания 
активируется добавлением к смеси кальция тромбопластина. 

Для  разведения  стандарта  и  препаратов  используют  NaCl-

имидазоловый  буферный  раствор  pH  7,3  с  добавлением  0,1%  раствора 
человеческого  или  бычьего  альбумина.  Для  построения  калибровочного 
графика готовят серию последовательных разведений стандарта фактора X в 
интервале  от  0,3  до  1 МЕ/мл.  Препарат  разводят  до  концентрации  менее  1 
МЕ/мл.  Анализируют  3  разведения  препарата.  Для  каждого  образца 
измерение  времени  свертывания  проводят  минимум  2  раза.  Измерение 
проводят непосредственно после разведения препарата. 

Анализ проводят при температуре (37±0,5)°С. В пластиковую пробирку 

вносят  50  мкл  плазмы,  дефицитной  по  фактору  X,  и  50  мкл  разведения 
стандарта или препарата. Смесь инкубируют при (37±0,5)°С в течение 120 – 
240 с. Время свертывания определяют с момента добавления к смеси 200 мкл 
предварительно  прогретого  до  температуры  (37±0,5)°С  кальция 
тромбопластина.  В  зависимости  от  техники  постановки  анализа  объемы 
реагентов могут варьироваться в соответствующей пропорции. 

Калибровочный  график  строят  в  полулогарифмических  координатах. 

По логарифмической оси абсцисс откладывают значения активности фактора 
X,  по  оси  ординат  –  время  свертывания  соответствующих  разведений 

Предыдущая <  | 3149  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF