background image

стандарта.  Активность  фактора  X  для  каждого  разведения  испытуемого 
образца  находят  по  калибровочному  графику.  Активность  фактора  X  (

А

)  в 

исследуемом образце рассчитывают по формуле: 

,

k

A

A

x

=

 

где: 

x

A

  активность  соответствующего  разведения  исследуемого  образца, 

найденная по калибровочному графику; 

k

 разведение исследуемого образца. 

 

2.

 

Хромогенный метод 

Фактор  X  активируют  с  помощью  полученного  из  змеиного  яда  FX-

активатора.  Активированный  фактор  X  (FXa)  селективно  расщепляет 
хромогенный субстрат FXa-1 N-α-бензилоксикарбонил-D-аргинил-L-глицил-
L-аргинин-4-нитроанилида 

дигидрохлорид, 

N-бензоил-L-изолейцил-L-

глутамил-глицил-L-аргинин-4-нитроанилида  гидрохлорид,  метансульфонил-
D-лейцил-глицил-L-аргинин-4-нитроанилид, 

метоксикарбонил-D-

циклогексилаланил-глицил-L-аргинин-4-нитроанилида 

ацетат 

с 

образованием 

п

-нитроанилина.  Образцы  исследуют  фотометрическим 

методом  при  405  нм.  Количество  фактора  X  пропорционально  увеличению 
оптической плотности раствора. 

Определение  фактора  X  хромогенным  методом  осуществляют  с 

помощью  специальных  тестовых  наборов.  Анализ  выполняется  в 
соответствии  с  инструкцией  к  набору.  Стандартный  образец  и  препарат 
предварительно  разводят  плазмой,  дефицитной  по  фактору  X,  до 
концентрации  ~  1  МЕ/мл  (основное  разведение).  Из  основного  разведения 
готовят с помощью буферного раствора 3 разведения стандартного образца (в 
соответствии  с  инструкцией)  и  3  разведения  препарата.  Каждое  разведение 
стандартного  образца  определяют  двухкратно,  полученные  значения 
используют для построения  калибровочного графика. Испытуемые образцы 
определяют трехкратно. 

Предыдущая <  | 3150  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF