Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

полуколичественным методом путем визуальной оценки агглютинации в
серии разведений.

Полуколичественный метод

Из стандартного образца и восстановленного раствора препарата

готовят последовательные разведения в  0,9% растворе натрия хлорида с 1–
5%  раствором  альбумина  человека  до  ожидаемого  содержания  фактора
Виллебранда  0,5,  1,0  и  2,0  МЕ/мл.  По  0,05  мл  каждого  разведения
стандартного  образца  и  исследуемого  препарата  наносят  на  предметное
стекло,  добавляют  по  0,1  мл  суспензии  тромбоцитов  с  ристоцетином  и
перемешивают  в  течение  1  мин.  В  качестве  отрицательного  контроля
используют  раствор  разведения.  После  1 мин  инкубации  при  комнатной
температуре

визуально

оценивают

агглютинацию

тромбоцитов.

Максимальное разведение, при котором происходит агглютинация
тромбоцитов, является титром ристоцетиновой коферментной активности
образца.

Количественный метод

Готовят не менее 2 серий последовательных разведений стандартного и

испытуемого образцов с помощью буфера для разведения до ожидаемого
содержания фактора Виллебранда 0,5, 1,0 и 2,0 МЕ/мл.

Определение проводят в соответствии с инструкцией производителя

автоматизированного оборудования. Получают значения зависимости
изменения оптического поглощения (степени мутности раствора) от активности
фактора Виллебранда.

Определение содержания фактора Виллебранда в испытуемом препарате

осуществляют с использованием коэффициентов линейного уравнения
зависимости оптической плотности раствора от содержания фактора
Виллебранда в стандартном образце.

Иммуноферментный метод

Метод основан на определении коллаген-связывающей активности

фактора Виллебранда. При специфическом связывании фактора Виллебранда