Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

Метод гемагглютинации «на плоскости» (Метод А)

В стеклянные пробирки или лунки планшета вносят равное количество

соответствующего разведения препарата и 3% суспензии D-положительных
эритроцитов человека группы крови I (0)

−

первый ряд и 3% суспензии D-

отрицательных эритроцитов человека группы крови I (0)

−

второй ряд. К

подготовленному разведению стандартного образца также добавляют равное
количество  3%  суспензии  D-положительных  эритроцитов  человека  группы
крови  0  (первый  ряд)  и  3%  суспензии  D-отрицательных  эритроцитов
человека  группы  крови  0  (второй  ряд).  Пробы  осторожно  встряхивают  (на
шейкере)  в  течение  10  сек,  затем  центрифугируют  в  течение  1  мин  при
80 об/мин.  Пробирки  (планшеты)  располагают  под  углом  70°  к
горизонтальной  поверхности  и  оценивают  визуально  агглютинацию
эритроцитов через 4 – 5 мин (но не более чем через 10 мин).

Содержание анти-D антител, определяемое максимальным разведением

препарата, при котором наблюдают агглютинацию любой интенсивности,
сравнивают с содержанием анти-D антител в положительном стандартном
образце.

Метод гемагглютинации в геле (Метод В)

Гелевый метод основан на использовании гелевой карты,

представляющей собой пластиковый планшет с микропробирками,
наполненными гелевыми колонками. Каждая микропробирка состоит из
дозирующей/инкубационной

камеры

колонки,

содержащей

полимеризованные микросферы декстрана в буферном растворе низкой
ионной силы (LISS).

В дозирующую/инкубационную камеру микропробирки вносят по 1

капле 0,8 % суспензии стандартных D-положительных эритроцитов человека
группы крови 0 (первый ряд) или по 1 капле 0,8% суспензии стандартных D-
отрицательных эритроцитов человека группы крови 0 (второй ряд) и по
25,0 мкл соответствующего разведения испытуемого образца. Одновременно
готовят пробы положительного и отрицательного стандартных образцов