background image

по  методу  Аппельмана  от  10

-  1 

до  10

-8 

(10

-9

  или  выше,

 

в  зависимости  от 

специфической  направленности  бактериофага).  Затем  смешивают  1  мл 
разведенного фага из пробирок с разведениями 10

-6

, 10

-7

, 10

-8 

разведений с 5 

мл  расплавленного  и  остуженного  до  температуры  45  °С  0,7  % 
мясопептонного агара. Затем добавляют (0,2 

±

 0,05) мл 18-часовой бульонной 

культуры  посевного  штамма,  подготовленного  из  суточной  культуры, 
выращенной на плотной питательной среде, в соответствии с требованиями к 
производственным бактериальным штаммам. Содержимое пробирок быстро 
перемешивают   вращением пробирок между ладонями, чтобы не произошло 
застывания  агара,  и  выливают  вторым  слоем  на  поверхность  1,5  %  агара  в 
чашках Петри. После застывания верхнего слоя агара чашки инкубируют в 
течение  18  ч  при  температуре  (37 

±

  1)  °С.  Для  определения  концентрации 

фаговых  частиц  в  маточном  фаге  подсчитывают  количество  негативных 
колоний (прозрачные пятна на матовом фоне глубинного роста бактерий) в 
каждой  чашке,  умножают  на  коэффициент  разведения  фага  в  пробирке  с 
соответствующим  разведением.  Затем  вычисляют  среднее  значение  3 
определений. 

Данная методика используется при отборе перспективных фаговых рас 

в  коллекцию  маточных  бактериофагов.  От  вида  бактериофагов  зависит 
порядок применяемых в опыте разведений. 

рН. 

Показатель  pH  фаголизата  должен  составлять  от  6,6  до  7,8. 

Испытание проводят потенциометрическим методом в  соответствии с ОФС 
«Ионометрия». 

Стерильность. 

Очищенный  и  концентрированный  фильтрат 

фаголизатов должен быть стерильным. Испытание проводят в соответствии с 
ОФС «Стерильность». 

Аномальная  токсичность.

  Введение  мышам  очищенного  фильтрата 

фаголизатов не должно вызывать гибель животных. Определение проводят в 
соответствии  с  ОФС  «Аномальная  токсичность».  Тест-доза  препарата 
бактериофага в объеме 1 мл вводится животным подкожно.

 

Предыдущая <  | 2529  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF