Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

характеризует биологическую активность белка при клиническом
применении.

При

необходимости

следует

охарактеризовать

иммунохимические  свойства.  Все  используемые  методы  должны  быть
обоснованы.  Характеристика  белка,  полученная  данными  методами,
формирует  требования  к  стандартному  образцу,  необходимому  для  оценки
подлинности и чистоты белка.

Очищенный белок должен оцениваться на подлинность, чистоту,

специфическую  активность,  удельную  активность  (активность  на  единицу
массы  белка),  микробиологическую  чистоту,  бактериальные  эндотоксины  с
использованием  соответствующих  методов  и  стандартных  образцов  (СО).
При  оценке  подлинности  необходимо  подтверждение  первичной  структуры
белка.  При  оценке  чистоты  необходимо  определение  родственных
соединений и посторонних примесей. К родственным соединениям относятся
димеры,  полимеры,  агрегаты,  модифицированные  формы  (окисленные,
деамидированные, укороченные формы белка, продукты деградации белка),
формы белка с нетипичным формированием дисульфидных связей, наличием
N-  и  О-гликозидных  модификаций.  К  посторонним  примесям  относятся
субстраты,  появление  которых  связано  с  технологическим  процессом
(например,  компоненты  питательных  сред,  белок  и  ДНК  клеток  хозяина  и
штамма-продуцента, иммуносорбенты для афинной хроматографии и другие
вещества, использовавшиеся в процессе производства).

При необходимости в очищенном белке оценивают степень и профиль

гликозилирования, содержание углеводов и липидов.

Требования к очищенному белку указывают во внутренней

спецификации.

Для подтверждения подлинности получаемого белка возможно

использование комплекса различных методов:

−

секвенирование N-концевой последовательности и определение С-

концевой аминокислоты;

−

пептидное картирование, с применением химического или