background image

Оценка  экспрессирующей  конструкции  (плазмидный  или  вирусный  век-

тор) должна быть проведена в соответствии с требованиями ОФС «Лекарствен-
ные средства, получаемые методами рекомбинантных ДНК» с учетом особен-
ностей ДНК-вакцин. Должны быть указаны все установленные и непредвиден-
ные рамки считывания. Методы, используемые для подтверждения включения 
гена в вектор или вектора в клетку хозяина, включают использование рестрик-
тазного картирования,  полимеразной цепной реакции, секвенирования  полной 
последовательности ДНК, последнее является предпочтительным

.

 

Допустимое количество пассажей вектора в готовом продукте или пере-

севов из главного посевного материала не должно превышать количества пас-
сажей  или  пересевов,  использованных  для  препаратов,  эффективность  и  без-
опасность которых были установлены в клинических исследованиях. 
Если в ДНК вакцине используется больше одного вектора, каждый вектор дол-
жен быть охарактеризован, как указано выше. 

Все  манипуляции  с  банками  клеток  и  полученными  культурами  клеток 

должны  проводиться  в  зоне,  свободной  от  одновременной  работы  с  другими 
клетками или векторами.  

Бактериальные клетки, используемые в производстве  

плазмидных векторов

 

Получение  плазмидных  векторов  основано  на  использовании  системы 

банка бактериальных клеток, с получением и характеристикой главного банка 
клеток, рабочего банка клеток и посевного материала. Анализ проводится один 
раз для проверки каждого нового РБК, за исключением чистоты, которая про-
веряется при каждой ферментации. РБК получают путем культивирования кле-
ток из одной или более ампул ГБК. Регистрируются методики и реактивы, ис-
пользованные для получения банка, и условия хранения. ГБК и РБК  должны 
иметь  четко  документированную  историю  их  получения.  Главные  и  рабочие 
банки  клеток  контролируются  путем  проведения  испытаний  на  аликвоте  хра-
нящегося в банке материала или полученного путем субкультивирования банка 
клеток.  В  таблице  приведены  испытания,  обязательные  для  проведения  на 

2661