Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

Оценка экспрессирующей конструкции (плазмидный или вирусный век-

тор) должна быть проведена в соответствии с требованиями ОФС «Лекарствен-
ные средства, получаемые методами рекомбинантных ДНК» с учетом особен-
ностей ДНК-вакцин. Должны быть указаны все установленные и непредвиден-
ные рамки считывания. Методы, используемые для подтверждения включения
гена в вектор или вектора в клетку хозяина, включают использование рестрик-
тазного картирования, полимеразной цепной реакции, секвенирования полной
последовательности ДНК, последнее является предпочтительным

Допустимое количество пассажей вектора в готовом продукте или пере-

севов из главного посевного материала не должно превышать количества пас-
сажей или пересевов, использованных для препаратов, эффективность и без-
опасность которых были установлены в клинических исследованиях.
Если в ДНК вакцине используется больше одного вектора, каждый вектор дол-
жен быть охарактеризован, как указано выше.

Все манипуляции с банками клеток и полученными культурами клеток

должны проводиться в зоне, свободной от одновременной работы с другими
клетками или векторами.

Бактериальные клетки, используемые в производстве

плазмидных векторов

Получение плазмидных векторов основано на использовании системы

банка бактериальных клеток, с получением и характеристикой главного банка
клеток, рабочего банка клеток и посевного материала. Анализ проводится один
раз для проверки каждого нового РБК, за исключением чистоты, которая про-
веряется при каждой ферментации. РБК получают путем культивирования кле-
ток из одной или более ампул ГБК. Регистрируются методики и реактивы, ис-
пользованные для получения банка, и условия хранения. ГБК и РБК  должны
иметь  четко  документированную  историю  их  получения.  Главные  и  рабочие
банки  клеток  контролируются  путем  проведения  испытаний  на  аликвоте  хра-
нящегося в банке материала или полученного путем субкультивирования банка
клеток.  В  таблице  приведены  испытания,  обязательные  для  проведения  на