Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 2

Проведение испытания

Определение подлинности препаратов интерферона проводят на моно-

слое культур клеток.

Количество клеток, вносимых в каждую лунку 96-луночных культу-

ральных планшетов, должно быть достаточным для дальнейшего экспонен-
циального роста клеточной культуры и образования полноценного монослоя
в условиях культивирования при температуре (37±1)

С в атмосфере с

(5,0±0,5) % СО

в течение 24-48 ч.

Готовят рабочие дозы ИП и СО. Для этого их разводят средой для раз-

ведения интерферона с содержанием 2 – 5 % сыворотки до одной десятой
титра противовирусной активности (раздел «Специфическая активность»).

Нейтрализующие антитела разводят средой для разведения до концен-

траций, указанных в нормативной документации.

Для приготовления нейтрализованной смеси подготовленные разведе-

ния антител объединяют в равных объемах с рабочими дозами ИП и СО. По-
лученную смесь инкубируют при температуре (37±1)

С в атмосфере с

(5,0±0,5) % СО

в течение 1 ч.

Из лунок 96-луночного планшета с монослоем культуры клеток удаля-

ют ростовую среду, вносят в лунки планшета нейтрализованную смесь, не
менее чем по 4 лунки на каждое разведение антител.

Нейтрализованную смесь допустимо вносить в лунки 96-луночного

планшета как до внесения культуры клеток, так и после него.

Для оценки качества монослоя клеток в процессе постановки реакции

нейтрализации (контроль) оставляют не менее 4 лунок, в которые не вносят
нейтрализованную смесь. В этих лунках заменяют ростовую среду на под-
держивающую.

Для контроля защитного действия интерферона также оставляют по 4

лунки на рабочие разведения СО и ИП без нейтрализующих антител.