По истечении 28 сут всем иммунизированным животным вводят под
кожу внутренней поверхности верхней трети бедра по (50
±
10) LD
50
столбнячного токсина в объеме 0,5 мл. Опыт сопровождают контролем
величины LD
50
столбнячного
токсина. Для этого неиммунизированным
мышам из той же партии, разделенным на 3 группы (не менее 4 мышей в
каждой группе), вводят столбнячный токсин в дозах 0,5, 1 и 2 LD
50.
За
иммунизированными животными и животными контрольной группы
наблюдают 4 сут, регистрируя число выживших мышей без явлений
столбняка.
На основании полученных результатов производят расчет
иммуногенной активности столбнячного анатоксина с помощью
статистических программ, включающих
Probit analysis,
или по формуле
Кербера, определяя величины ED
50
для референс-препарата и испытуемой
вакцины. Также рассчитывают количество LD
50
токсина, введенного
иммунизированным животным.
Формула Кербера:
−
для испытуемого образца и референс-препарата:
lg ED
50
= lg D
N
–
σ
(
Σ
Li–0,5),
−
для токсина:
Lg LD
50
= lg D
N
–
σ
(
Σ
Li–0,5),
где: D
N
−
величина максимальной из испытуемых доз;
σ
−
логарифм кратности разведения (отношение большей дозы к
следующей за ней меньшей дозе);
Li – отношение количества выживших мышей без явлений столбняка
(для LD
50
– павших) к общему числу животных, получивших данную дозу;
Σ
Li – сумма значений Li, найденных для всех испытуемых доз.
Испытание считается проведенным правильно, если:
Предыдущая < | 2757 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF