background image

После каждого взятия крови пробы центрифугируют в течение 5 мин 

при  температуре  5°С  и  при  величине  относительного  центробежного 
ускорения  (ОЦУ),  равной  1500  g  (Примечание  3).  От  каждой  пробы 
отбирают,  например,  по  10  мкл  плазмы  и  переносят  в  микрокювету 
плоскодонного  96-луночного  планшета,  который  можно  хранить  при 
температуре от 6 до 8°С до окончания испытания.  

Перед определением концентрации глюкозы в каждую микрокювету с 

плазмой  добавляют  по  240  мкл  готового  энзимо-хромогенного  набора, 
например,  реактива  «GLUCOSE  Liquicolor»  или  аналогичного.  Планшеты 
инкубируют при температуре (37 ± 1) 

°

С не менее 20 мин.  

Измерение оптической плотности проводят при длине волны 492 нм. 

В качестве раствора сравнения используют стандартный раствор глюкозы с 
концентрацией 5,55 ммоль/л (100 мг %), входящий в состав готового энзимо-
хромогенного набора.  

Концентрацию глюкозы (с) в крови рассчитывают по формуле: 

с

=

А

А

0

100

мг

%,

где

 

А - оптическая плотность пробы; 
А

0

 - оптическая плотность глюкозы в растворе сравнения. 

 

Примечание 1 

 

 Приготовление основных растворов СО и ИО инсулина или его аналога.  

Навеску  СО  инсулина  растворяют  в  0,2  мл  0,1  М  раствора 

хлористоводородной  кислоты  до  полного  растворения  субстанции,  а  затем 

добавляют растворитель  для получения раствора с концентрацией инсулина 

100  МЕ/мл.  В  качестве  растворителя  используют  0,1  М  раствор  кислоты 

хлористоводородной,  разведенной  в  33,3  раза  раствором  натрия  хлорида 

0,9% для инъекций.  

Основной  раствор  следует  хранить  при  температуре  от  2  до  8°С. 

Замораживание не допускается. Раствор должен быть прозрачным.  

При  определении  биологической  активности  субстанции  инсулина 

основной  раствор  готовят  таким  же  образом,  что  и  основной  раствор  СО. 

Разведение субстанции проводят, исходя из величины биологической  

активности инсулина с учетом фактического содержания влаги. 

Предыдущая <  | 1126  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF