background image

МЕТОД 9.  Использование  масс-спектрометрического  детектирования 
для 

определения 

производных 

аминокислот, 

полученных 

предколоночной дериватизацией. 

Масс-спектрометрическое  детектирование  в  режимах  мониторинга  по 

выделенным ионам (MS) или мониторинга множественных реакций (MS/MS) 
с  электрораспылительной  или  химической  ионизацией  при  атмосферном 
давлении  позволяет  проводить  высокочувствительное  и  селективное 
определение 

производных 

аминокислот 

после 

предколоночной 

дериватизации  с  различными  реагентами,  описанными  выше.  Разделение 
производных  аминокислот  обычно  осуществляется  методом  обращенно-
фазовой  ВЭЖХ  в  режиме  градиентного  элюирования  при  использовании 
элюентов на основе легколетучих компонентов (органические кислоты и их 
аммонийные  соли,  гидрокарбонат  аммония,  аммиак  и  алкиламины  и  пр.). 
Высокая селективность масс-спектрометрического детектирования позволяет 
выполнять  экспрессный  анализ  сложных  смесей  аминокислот  без 
необходимости  достижения  полноты  разделения  критичных  пар  и  групп 
пиков. Пределы обнаружения производных аминокислот обычно составляют 
несколько нг/мл. 

Использование  масс-спектрометрического  детектирования  для 

определения 

нативных 

аминокислот 

также 

возможно, 

однако 

характеризуется значительно меньшей чувствительностью. 
 

МЕТОД 10.  Определение  нативных  аминокислот  с  импульсным 
амперометрическим детектированием 

Аминокислоты  в  белковом/пептидном  гидролизате  разделяются 

ионохроматографически на колонке, заполненной гидрофобной полимерной 
анионообменной  смолой  с  тетраалкиламмониевыми  функциональными 
группами.  Разделение  проводят  в  градиентном  режиме  путем  изменения 
концентрации гидроксид- и ацетат-ионов в водном элюенте. Детектирование 
аминокислот  в  элюате  осуществляется  при  помощи  импульсного 

Предыдущая <  | 701  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF