-
менингококковые сыворотки серогрупп А и С
,
и диагностикумы ме-
нингококковые эритроцитарные серогрупп А и С
;
- 0,9 %
раствор натрия хлорида
.
Определение рабочего разведения менингококковых диагностических
сывороток.
Для приготовления рабочего разведения менингококковых диа-
гностических сывороток определяют их специфический титр в РТПГА
с диа-
гностикумами эритроцитарными менингококковыми серогрупп А и С.
Для
постановки РТПГА используют круглодонный планшет для иммунологиче-
ских реакций однократного применения
.
В
2
ряда лунок, начиная со второй,
вносят
по
50 мкл
0,9 %
раствора натрия хлорида
.
В первые лунки вносят по
100 мкл менингококковых сывороток
серогрупп А и С, разведенных
1:10
с
помощью 0,9 % раствора натрия хлорида.
Далее готовят двукратные после-
довательные разведения каждой сыворотки, перенося из лунки в лунку по 50
мкл сыворотки. Из последней лунки 50 мкл разведения сыворотки удаляют.
Затем в каждую лунку прибавляют
по 25 мкл
эритроцитарного
диагностику-
ма, гомологичного сыворотке.
В
4
лунки (контроль отсутствия спонтанной
агглютинации диагностикума)
вносят по 5
0
мкл 0,9 % раствора натрия хло-
рида. В
2
лунки добавляют по 25 мкл диагностикума
серогруппы
А, а
в
2
другие
–
по 25 мкл диагностикума серогруппы С. После перемешивания ин-
гредиентов путем покачивания планшет
помещают в термостат при темпера-
туре от 36 до 38
°
С на 2
–
2,5 ч, после чего проводят учет результатов.
По-
следнее разведение сывороток, в котором
наблюдается агглютинация почти
всех эритроцитов с малозаметным кольцом из осевших неагглютинирован-
ных эритроцитов, является титром сыворотки и содержит 1 гемагглютини-
рующую единицу (ГАЕ). Предыдущее разведение содержит
2 ГАЕ и исполь-
зуется в качестве рабочего разведения сыворотки.
В контрольных лунках агглютинация должна полностью отсутствовать,
а эритроциты
выпадать на дно лунки в виде полусфер.
Проведение РТПГА
.
В первые лунки
2
рядов планшета для иммуноло-
гических реакций вносят по 50 мкл испытуемого раствора вакцины менин-
Предыдущая < | 5292 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF