Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 4

ния

заполняют камеру Горяева и через 5

–

10 мин с помощью

микроскопа с

фазово

контрастным устройством (объектив

, окуляр

) подсчитывают

количество спор в 10 больших квадратах сетки. Число спор (ОК) в 1 ампуле
(1 мл) исходной вакцины определяют по формуле:

ОК = 25000

∙

где

–

количество спор в 10 больших квадратах;

–

кратность разведения;

25000 –

постоянная величина для камеры данного типа.

2. Количество живых спор.

Количество

живых спор

должно

составлять

не менее 40

от общей концентрации.

В исследованиях используют агар Хоттингера

–

аминный азот

(230 ±

10)

мг

рН

(7,2 ± 0,1) –

или мясопептонный агар (МПА), рН

(7,2 ± 0,1).

При определении содержания живых микробных клеток в вакцине ис-

пользуют концевые химически чистые пипетки и пробирки со стерильной
водой

очищенной

Содержимое каждой из

ампул ресуспендируют в 1 мл стерильной во-

ды очищенной,

встряхивают до образования гомогенной взвеси.

Содержимое

каждой

ампулы с помощью стерильных пипеток переносят в

стерильные

колбы вместимостью 250 мл с 99 мл воды

очищенной

и фарфоровыми или

стеклянными бусами и закрывают ватно

марлевыми пробками. Колбы

поме-

щают на шуттель

аппарат и

выдерживают

в течение 30 мин при температуре

(20 ±

2) °С и скорости

покачиваний в минуту.

Исходя из

общей концентрации спор, определенной в камере Горяева,

взвесь спор десятикратно разводят водой очищенной до содержания

пример-

но 1000 спор в 1 мл. Например, из взвеси спор, разведенной в колбе в 100 раз,
делают 5 последовательных десятикратных разведений, используя для каж-
дого разведения отдельную пипетку вместимостью 1 мл, и получают

послед-

нее разведение

-7

, в котором будет содержаться 1000 спор/мл