Из разведения, содержащего около 1000 спор в 1 мл,

 

высевают по 0,1 

мл на 5 чашек Петри с питательной средой, равномерно распределяя матери-
ал  на  поверхности  среды  стеклянным  шпателем  или  методом  покачивания. 
Чашки переворачивают и инкубируют при температуре

  

(36 ± 1) 

°С в течение 24

 – 

36 ч, после чего подсчитывают количество 

 

вырос-

ших колоний на каждой чашке

 

Петри

. 

Расчет концентрации живых спор

 

(БК), выраженное количеством спор

 

в 

1 мл вакцины

, 

проводят по формуле:

 

БК

=

2

∙ 𝑛𝑛 ∙ 𝑝𝑝

3  ,

 

где

:    2 – 

коэффициент пересчета

 

на 1 мл пробы;

 

n

 – 

общее количество колоний, выросших на 15 чашках при высеве 0,5 

мл каждой из 

3 

исследуемых проб;

 

p

 – 

кратность разведения.

 

 

Процентное содержание

 

живых спор вычисляют по формуле:

 

% 

живых

 

спор

=

БК

ОК

 

∙

100 

 

3.  Иммуногенность  для  морских  свинок.

 

Индекс  иммунитета  должен 

быть не менее 10000 (отношение величины 

LD

50

 

заражающего тест

-

штамма 

B. anthracis

 

71/12 для иммунизированных животных к величине 

LD

50

 

для не-

иммунизированных животных

). 

Иммунизируют  испытуемой  вакциной  20  морских свинок  обоего пола 

массой

 (275 ± 25) 

г однократно подкожно в область внутренней поверхности 

бедра  в  дозе  50  млн  спор  в  объеме  0,5  мл.  Одновременно  20  контрольным

 

морским свинкам вводят по 0,5 мл стерильного 0,9 % раствора натрия хлори-
да. Через 21 сут иммунизированных и неиммунизированных животных под-
кожно инфицируют тест

-

штаммом 

B. anthracis

 

71/12. Для заражения иммуни-

зированных животных используют дозы 10

6

;  10

7

;  10

8

 

и 10

9 

, 

разведенные из 

общего  количества  спор;

 

для  неиммунизированных

 

животных  используют 

дозы

 10

2

; 10

3

; 10

4

 

и 10

5

, также разведенные из общего количества спор

 

тест

-

Предыдущая <  | 5302  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF