Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 4

В каждую из 3 ампул (флаконов) вносят 5 мл воды очищенной, встря-

хивают до образования гомогенной взвеси. Далее определение проводят

по

методике в соответствии с ФС «Вакцина сибиреязвенная живая»

2. Активность (ПА.

Активность ПА должна быть не менее 50 ЕА/мл.

Определение проводят методом иммунодиффузии в агаре по Оухтер-

лони

с иммуноглобулином противосибиреязвенным лошадиным. Для приго-

товления агара к 1 л 0,1 М фосфатного буферного раствора, рН (7,8

0,1)

добавляют 1 % агара, 1 % желатина и 0,25 % раствор фенола. Агар стерили-
зуют 15 мин при температуре (115

С и в горячем виде осветляют цен-

трифугированием при 2000 об/мин в течение 5 мин. Готовый агар разливают
в чашки Петри, помещенные на строго горизонтальную поверхность, слоем
толщиной 6 мм. Стерильным штампом

пробойником вырезают 1 централь-

ную и 6 радиальных лунок, расстояние между центрами которых составляет
10 мм (можно выполнять этот этап по трафарету). Агар из лунок удаляют.

Вакцину последовательно разводят 0,2 М фосфатным буферным рас-

твором, рН (7,2

0,1), до разведений 1:2; 1:4; 1:6; 1:8. В центральную лунку

вносят 0,04 мл цельного иммуноглобулина противосибиреязвенного лошади-
ного, а в радиальные лунки по часовой стрелке

–

все разведения вакцины,

начиная с цельного неразведенного препарата. Чашки помещают в эксикатор,
содержащий воду очищенную, при температуре (19

С в течение 3 сут.

Предварительный учет результатов проводят через 24 ч, окончательный

–

на

3 сут.

Активность ПА оценивают по максимальному разведению вакцины,

при котором образуется видимая линия

преципитации с иммуноглобулином

противосибиреязвенным, и выражают в единицах активности (ЕА/мл).

Расчет ПА (

) в ЕА/мл проводят по формуле:

= ― ,