Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 4

хроматографическая колонка длиной 0,25 м, диаметр 4,6 мм, непо-

движная фаза силикагель нитрильный (10 мкм);

подвижная фаза

–

изоамиловый спирт

–

гексан (1,69 : 98,4)

;

скорость потока подвижной фазы 1,1 мл/мин;

температура колонки

– 25

С.

350 мкл раствора сравнения вводят в инжектор хроматографа. Элюат

начинают собирать за 2 мин до наступления и в течение 2 мин после наступ-

ления времени удерживания холекальциферола в пробирку с притертой

пробкой, содержащую бутилгидрокситолуола в гексане. Процедуру повто-

ряют с испытуемыми растворами 1 и 2. Из каждой пробирки удаляют раство-

ритель током азота при температуре не выше 30

С. Каждый из полученных

остатков растворяют в 1,5 мл ацетонитрила.

Условия хроматографирования

жидкостной хроматограф с УФ

детектором;

аналитическая длина волны

–

265 нм;

хроматографическая колонка длиной 0,15 м, диаметр 4,6 мм, непо-

движная фаза силикагель октадецилсилильный для хроматографии (5 мкм);

подвижная фаза

–

ацетонитрил (для ВЭЖХ)

–

фосфорная кислота

концентрированная (99,8 : 0,2);

скорость потока подвижной фазы 1,

мл/мин;

температура колонки

– 25

Проверка пригодности хроматографической системы

Хроматографическая система считается пригодной, если выполняются

следующие условия:

относительное стандартное отклонение площади пика колекальцифе-

рола на хроматограмме раствора сравнения не должно превышать 5 %;

эффективность хроматографической колонки, рассчитанная по пику

колекальциферола, должна составлять не менее 1000 теоретических тарелок;

фактор асимметрии пика колекальциферола должен составлять от 0,7

до 1,5.

инжектор хроматографа вводят не более 50 мкл каждого из трех рас-

творов, полученных в результате очистки, и хроматографируют в указанных