Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 4

белых мышей, разводят до концентрации 10

м.к./мл. По 0,1

мл взвеси с кон-

центрацией 10

м.к./мл (100 м.к.) высевают на 3 чашки Петри с одной

из вы-

шеперечисленных питательных сред

и инкубируют

при температуре (27

± 1)

С в течение 48 ч. Количество выросших колоний на чашках

учитывают при

вычислении Е

испытуемой серии.

Подкожное заражение морских свинок проводят во внутреннюю по-

верхность правого бедра на 21 сут, мышей

–

в ту же область на 7

или 21 сут

после иммунизации. Заражающая доза для иммунизированных вакциной жи-
вотных составляет 200

Dcl (Dosis certa letalis = LD

100

) вирулентного штамма

чумного микроба, 1

Dcl

которого

не должна превышать 100 микробных кле-

ток.

Подготовка заражающего штамма

Y. pestis

231

должна быть указана

нормативной документации

Для заражения неиммунизированных (контрольных) животных исполь-

зуют взвесь

с концентрацией

50 м.к./мл в объеме 0,5 мл для морских свинок

и 125

м.к./мл в объеме 0,2 мл для белых мышей, что соответствует 1

Dcl.

Для определения фактического содержания микробных клеток заража-

ющего штамма по 0,1 мл взвеси культуры

Y. pestis

231,

содержащей 10

м.к./мл

высевают на 3 чашки Петри с агаром Хоттингера и равномерно рас-

пределяют по всей поверхности среды методом «обкатки» чашек. Посевы
инкубируют при температуре (27

± 1)

ºС в течение 48 ч, после чего подсчи-

тывают количество выросших колоний.

Наблюдение за зараженными животными ведут в течение 20 сут. Все

контрольные животные должны погибнуть от чумы в течение 10 сут

Погиб-

ших животных вскрывают, берут органы и ткани (у морских свинок берут
пробы из места введения, регионарных

паховых

лимфатических

узлов, пече-

ни, селезенки, легких, верхушки сердца; у белых мышей

–

из селезенки), вы-

севая их методом отпечатков

на чашки Петри с агаром Хоттингера с добав-

лением генцианвиолета

и с агаром Хоттингера

с натрием

сернистокислым.