Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 4

ждение дозы

навески).

ИСПЫТАНИЯ СУБСТАНЦИИ

Стерильность

. Субстанция должна быть стерильной. Субстанцию рас-

творяют в 0,9 % растворе натрия хлорида из расчета 1 мг в 1 мл. Определение
проводят в соответствии с ОФС «Стерильность».

Содержание белка

. Должно быть не ниже 75 %. Определение прово-

дят колориметрическим методом в соответствии с ОФС «Определение обще-
го азота с реактивом Несслера в биологических лекарственных препаратах».

Специфическая активность

Установление дозы-навески субстанции ППД, содержащей 50000 ТЕ

Определение проводят на 18 сенсибилизированных морских свинках путем
сопоставления активности разведений навесок порошка

полуфабриката

(суб-

станции) с активностью стандартного образца (СО) ППД (СО специфической
биологической активности очищенного туберкулина). Сенсибилизируют жи-
вотных внутрикожным введением в область живота (в 2

–

4 места) вакцины

БЦЖ или убитых нагреванием микобактерий туберкулеза в неполном адь-
юванте Фрейнда (0,5

–

1 мг микобактерий на 1 животное).

Три навески исследуемой субстанции ППД, массой не менее 50 мг

каждая, растворяют в фосфатном буферном растворе, рН (7,4 ± 0,05) таким
образом, чтобы в 1 мл субстанции ППД содержалось на 20 % ниже и выше
дозы навески СО ППД (получают 3 основных раствора). Сравнивают специ-
фическую активность основного раствора с СО ППД, проводя испытание на
6 сенсибилизированных морских свинках. Для этого из основного раствора
готовят разведения 1:40; 1:200 и 1:1000 и титруют относительно 5; 25 и 125
ТЕ СО, вводя внутрикожно по 0,1 мл каждого разведения сенсибилизирован-
ным морским свинкам в группе по методу случайной выборки (например,
метод латинских квадратов). Ответные реакции учитывают через 24 ч. Ста-
тистический анализ основан на том, что зависимость lg «доза

–

эффект» име-

ет линейный характер. Вычисляют средний угол наклона линий и подсчиты-