Аналогичным образом готовят разведения стандартного образца,
предварительно восстановленного водой для инъекций
до содержания 1 МЕ
в 1 мл.
Пробирки с разведенной вакциной и стандартным образцом хранят на
льду в течение времени постановки опыта, но не более 4 ч.
Для иммунизации используют мышей линии Ba
lb/c
или беспородных
мышей массой
(12 ± 2)
г без различия пола. Каждым разведением вакцины и
стандартного образца иммунизируют не менее
11
животных; 40 мышей из
этой же партии (контрольная группа) содержат в отдельных
клетках
до
проведения титрования фиксированного вируса бешенства штамм
«CVS»
(тест
-
штамм). Мышей иммунизируют внутрибрюшинно по 0,5 мл 2 раза с
интервалом 7 сут. На 7 сут после второй иммунизации вводят
фиксированный вирус бешенства штамм CVS интрацеребрально в объеме
0,03 мл шприцем вместимостью
1 см
3
. Для заражения всех
иммунизированных животных применяют разрешающее (рабочее)
разведение
вируса бешенства, содержащее от
20
до
100 LD
50
/0,03 мл вируса.
Одновременно с заражением иммунизированных мышей на неиммуни-
зированных мышах из контрольной группы проводят титрование фиксиро-
ванного вируса бешенства штамм CVS
для определения точной дозы вируса,
взятой в испытание. Для этого используют
разрешающее (рабочее)
разведе-
ние вируса (10
0
)
и его десятикратные разведения (10
-1
; 10
-2
; 10
-3
) на
2 % растворе сыворотки крови лошади нормальной, приготовленном с при-
менением стерильной воды очищенной или воды для инъекций. Сыворотку
крови лошади нормальную предварительно инактивируют при температуре
56
о
С в течение 30 мин. Каждым
разведением
вируса заражают не менее
чем
по
10 мышей интрацеребрально в объеме 0,03 мл.
За мышами наблюдают в течение 14 сут. При оценке результатов опыта
учитывают мышей, заболевших или павших с 5 по 14 сут.
Учет проводят
ежедневно. Клиническими симптомами на разных стадиях развития
Предыдущая < | 5376 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF