Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 4

дрожжей и субтип вируса гепатита В). В нормативной документации произ-
водителя должны быть указаны полные характеристики рекомбинантного
производственного штамма: клетки хозяина в сочетании с системой вектора
экспрессии, отсутствие контаминирующих агентов; данные о стабильности
плазмиды грибов в процессе хранения

культуры

Морфологические, культу-

ральные и физико

биохимические свойства штамма

продуцента рекомби-

нантного

штамма

дрожжей, продуцирующий

HBsAg,

должны сохраняться

при температуре минус (70

1) °С в течение 1 г.

Характеристика субстанции

Степень чистоты субстанции должна быть охарактеризована с помо-

щью методов определения доли потенциальных загрязняющих белков в об-
щем белке препарата

–

методом электрофореза

в полиакриламидном геле

(ПААГ

)

или

с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии

(ВЭЖХ). Степень очистки

HBsAg

должна быть не менее 95

Количество

остаточной ДНК дрожжевых клеток должно составлять не более 10 пг/доза.

Содержание

HBsAg

в субстанции определяют методом иммунофер-

ментного анализа (ИФА

)

. В качестве образца сравнения может использовать-

ся высокоочищенный референс

препарат предприятия с известным содержа-

нием

HBsAg

и белка. Образцы сравнения на основе продукта, содержащего

консервант, не пригодны в случае испытания

препаратов, не содержащих

консервант.

Содержание липидов и углеводов должно определяться в субстанции

(in balk)

до процедуры адсорбции антигена

на алюминия гидроксиде.

Пенициллин и другие антибиотики группы бета

лактамов

не должны

использоваться ни на одном из этапов производства

В случае, когда при очистке субстанции

используют моноклональные

антитела (иммунологическая аффинная хроматография для очистки

HBsAg),

используемые антитела должны быть охарактеризованы и определена сте-
пень их очистки.

Референс-препараты

Для определения иммуногенности рекомби-