Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 4

фатном буферном растворе, начиная с 1:10 до 1:1280. В каждую лунку вносят
по 0,4 мл 1 % суспензии эритроцитов. Содержимое лунок перемешивают
встряхиванием планшеты и оставляют при температуре (20

С на 40

–45

мин (до оседания эритроцитов в контроле).

Реакцию оценивают по «четырехкрестовой» системе. За титр антигена,

или одну агглютинирующую единицу (АЕ), принимают наибольшее разведе-
ние антигена, дающее четко выраженную агглютинацию эритроцитов

(+++

или ++++).

Определение титра антигена сопровождается отрицательным контро-

лем на отсутствие спонтанной агглютинации эритроцитов. С этой целью в
контрольную лунку того же плексигласового планшета

вносят 0,4 мл фос-

фатного буферного раствора и 0,4 мл 1 % суспензии эритроцитов. При отсут-
ствии спонтанной агглютинации на дне лунки выпадает гомогенный с ров-
ными краями осадок эритроцитов (отрицательная реакция).

Приготовление рабочей дозы антигена

. В РТГА рабочей дозой анти-

гена является то разведение антигена, в 0,2

мл которого содержится 4 агглю-

тинирующие единицы (4 АЕ). Для ее вычисления следует установленную ве-
личину титра антигена разделить на 8. Полученная от деления цифра указы-
вает во сколько раз нужно развести антиген, чтобы в 0,2 мл его содержалось
4 АЕ (рабочая доза).

Перед постановкой основного опыта проверяют точность приготовле-

ния рабочей дозы (4 АЕ). Для этого в пять лунок горизонтального ряда плек-
сигласового планшета, начиная со второй, вносят по 0,2 мл фосфатного бу-
ферного раствора. В 1

ю и 2

ю лунки добавляют по 0,2 мл приготовленной

рабочей дозы антигена. После перемешивания переносят 0,2 мл смеси из
лунки в лунку, начиная со 2

й по 5

ю лунку, из 5

й лунки 0,2 мл удаляют.

Затем в каждую лунку добавляют по 0,2 мл фосфатного буферного раствора
и по 0,4 мл 1 % суспензии куриных эритроцитов. В 6

й лунке ставят контроль

на отсутствие спонтанной агглютинации эритроцитов. После встряхивания
смесь оставляют при температуре (20

С на 40

–

45 мин (до оседания