background image

эритроцитов в контроле).

 

При  правильном  выборе  рабочей  дозы  полная  (++++)  агглютинация 

эритроцитов должна наблюдаться только в первых трех лунках. В 4

-

й и 5

-

й 

лунках агглютинация должна отсутствовать. В случае отклонения от указан-
ного  выше,  разведение  антигена  должно  быть  изменено  путем  добавления 
соответствующего количества антигена или фосфатного буферного раствора 
для получения необходимой рабочей дозы. При этом необходимо повторно 
проверить правильность приготовления рабочей дозы.

 

4. 

Постановка  реакции  торможения  гемагглютинации.

 

Сыворотки,

 

используемые  в  РТГА,  могут  содержать  неспецифические  ингибиторы  ге-
магглютинации.  Поэтому  для  их  удаления  перед  постановкой    РТГА  сыво-
ротки  необходимо  обработать  нейраминидазой  холерных  вибрионов  или 

RDE-

реагентом (Примечания).

 

После  удаления  неспецифических  ингибиторов  готовят  двукратные 

разведения  сывороток  в  лунках  плексигласовой  доски,  начиная  с  1:10  до 
1:640 и выше в объеме 0,2 мл. К каждому разведению сыворотки добавляют 
по 0,2 мл рабочей дозы антигена (4 АЕ).

 

Смесь встряхивают и

 

после контакта 

антигена и сыворотки (от 30 мин до 1 ч) при температуре (20 

±

 2) 

°

С в каж-

дую лунку добавляют по 0,4

 

мл 1 % суспензии куриных эритроцитов. Смесь 

повторно встряхивают, оставляют при температуре (20 

±

 2) 

°

С в течение 40

45 мин (до оседания эритроцитов в контроле), после чего производят учет ре-
зультатов реакции.

 

При наличии специфических антител в сыворотке наступает задержка 

агглютинации эритроцитов. За титр сыворотки принимают предельное разве-
дение, вызывающее полную задержку гемагглютинации.

 

Задержка гемагглютинации указывает на соответствие типа антигена и 

взятой сыворотки; отсутствие задержки гемагглютинации свидетельствует о 
несоответствии типа взятой сыворотки.

 

Примечания 

 

1.

 

Удаление  неспецифических  ингибиторов

 

гемагглютинации  из 

Предыдущая <  | 5392  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF