Содержание вирусного антигена должно быть не менее 320 ИФА единиц в
1
дозе вакцины для взрослых и не менее 160 ИФА единиц в
1
дозе вакцины для
детей;
определение проводят методом
ИФА с
использованием коммерческих
тест
-
систем для выявления антигена ВГА. Определение содержания антигена
ВГА в вакцине проводят параллельно с определением содержания антигена в
стандартном образце (СО
)
вакцины
.
Отношение содержания АГ ВГА в
1
дозе
вакцины к содержанию АГ ВГА в СО должно находиться в пределах от 0,66
до 1,66 при статистической
обработке результатов методом параллельных
линий.
Постановку контроля осуществляют в
соответствии с инструкцией по
применению используемой тест
-
системы.
Перед постановкой ИФА проводят предварительную десорбцию АГ
ВГА с алюминием гидроксида, центрифугируя 1000 мкл испытуемого образ-
ца вакцины и СО
при 6000 об/мин в течение 5 мин при комнатной темпера-
туре
.
Из 900 мкл надосадочной жидкости готовят
ряд последовательных дву-
кратных разведений
от
1:2 до 1:4
и осуществляют постановку ИФА с опреде-
лением титра АГ ВГА в надосадочной жидкости
(расчет
N
1
).
Осадок растворяют в 900 мкл буферного раствора для десорбции, тща-
тельно перемешивают и оставляют на ночь при температуре от 2
до 8
°
С. За-
тем центрифугируют при 6000 об/мин в течение 5 мин
при
комнатной
темпе-
ратуре
.
Из надосадочной жидкости готовят ряд последовательных двукрат-
ных разведений от 1:2 до 1:64 и определяют титр АГ ВГА методом ИФА
(расчет
N
2
).
Расчет
N
1
и
N
2
осуществляют
по формуле:
N
=(
Т
∙
V
1
)
V
2
,
где
N
–
расчетное количество ИФА единиц в
1
мл
готовой формы
вакцины;
Т
–
обратная величина титра антигена ВГА в ИФА
;
V
1
–
объем
1
дозы вакцины
,
мкл;
V
2
–
объем исследуемого образца в ИФА
,
мкл
.
Предыдущая < | 5422 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF