Суммарное содержание антигена ВГА в вакцине (
N
1
и
N
2
) должно быть
не менее 320 ИФА единиц в
1
дозе вакцины для взрослых и не менее 160
ИФА единиц
в
1
дозе вакцины для детей.
Примечание
Приготовление буферного раствора для десорбции
.
В градуированную
посуду вместимостью 50 мл
помещают 50 мг желатина, 7,16 г натрия фос-
форнокислого двузамещенного, 55 мг трилона
Б
(ЭДТА), 50 мкл твина
-
20 и
растворяют в 40 мл воды очищенной, доводят объем раствора водой до метки
и перемешивают.
Раствор хранят при комнатной температуре не более 1
мес.
Определение иммуногенной активности ВГА
Вакцина должна индуцировать
образование
антител
к
вирусу
гепатита
А у однократно
иммунизированных
белых нелинейных мышей
(самцов)
мас-
сой
18
−
20 г
.
Определение содержания антител к ВГА в
сыворотке крови
мышей проводят методом ИФА с определением ИД
50
,
которая
должна
со-
ставлять не менее
6.
В качестве образца сравнения используют СО вакцины.
Отношение ИД
50
в испытуемой вакцине к ИД
50
в СО должно находиться в
пределах от 0,
33
до
3 (
P
= 0,95)
при статистической
обработке результатов
методом параллельных линий.
Метод основан на определении дозы вакцины, способной вызвать
обра-
зование антител к вирусу гепатита А у 50
% мышей
.
Для проведения теста готовят серию разведений
испытуемого образца
и СО
вакцины от 1:2 до 1:32
.
Для разведения используют плацебо, в состав
которого входит
0,01 М фосфатно
-
солевой
буферный
раствор
(
рН 7,0
–
7,6 ) и
гель
алюминия гидроксида в концентрации от 0,35 до 0,65 мг/мл (по А1
+3
).
Методом случайной выборки формируют опытные и
контрольную
группы по
10 мышей в каждой.
Дополнительно
10 мышей оставляют интактными. Ко-
личество опытных групп должно соответствовать количеству используемых
разведений
.
Мышам опытных групп вводят разведения вакцины в объеме 1 мл под-
кожно в
2
точки, используя
1
разведение препарата на
1
опытную группу.
Мышам контрольной группы по той же схеме и тем же способом вводят пла-
Предыдущая < | 5423 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF