background image

использовать то же разведение неиммунной  кроличьей сыворотки, что и им-
мунной.

 

Смеси

 

вирус

-

сыворотка выдерживают при температуре 

37  +1  °

С в те-

чение 1 ч.

 

Постановка  реакции  нейтрализации. 

Используют  одну  из  указанных 

выше культур клеток.

 

Перед  внесением  на  монослой

 

культуры  клеток  смеси  ви-

рус

сыворотка,  ростовую  среду  сливают  и  монослой  промывают  один  раз 

раствором Эрла. Смесь вирус

-

сыворотка вносят в объёме 0,2 мл в каждые 3 

флакона с ФЭК или в каждые 3 лунки планшетов с клетками 

PS 

или 

Vero

Флаконы с ФЭК или планшеты с 

PS 

или 

Vero

 

помещают в термостат 

при температуре 

36+1 

°С на 2 ч., периодически обкатывают  монослой 

 

кле-

ток смесью вирус 

– 

сыворотка путем покачивания флаконов или планшетов 

через каждые 15 

– 

20 мин.

 

После адсорбции вируса, на клеточный монослой наносят питательный 

агар, пригодный для данной культуры клеток

Учёт результатов. 

Учёт результатов

 

проводят на 5 сут при титровании 

в культуре клеток ФЭК

 

или 

PS

, или на 6

7 сут при титровании вируса в куль-

туре клеток 

Vero

. Подсчитывают количество бляшек отдельно в каждой лун-

ке  или  флаконе.  Затем  вычисляют  среднее  количество  бляшек

 

из  3  лунок 

планшета  или  3

 

флаконов,  соответственно  для  каждого  разведения  вируса. 

Титр  вируса  с  иммунной  и  не  иммунной    сыворотками  подсчитывают,  как 
описано  в  разделе  «Специфическая  активность»  и  выражают  в  десятичных 
логарифмах

 

БОЕ

 

(бляшкообразующих единиц)

Индекс  нейтрализации  (подлинность  вируса  желтой  лихорадки)  пред-

ставляет собой разницу 

lg 

титров вируса с не иммунной сывороткой  и им-

мунной

 

сывороткой и должен быть не менее 1,0 

lg. 

Предыдущая <  | 5430  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF