Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 4

цины желтой лихорадки, откалиброванного по Международному стандарту
вакцины желтой лихорадки.

Одну ампулу стандартного образца титруют три

раза для подтверждения достоверности каждого количественного определе-
ния активности.

Определение специфической активности вакцины (титр в БОЕ).

Определение специфической активности (титр в

БОЕ

) вакцины проводят пу-

тем титрования

вируса

методом бляшек в культурах клеток ФЭК,

или

Vero

Готовят последовательные разведения вакцины

: 1:10; 1:100; 1:000;

1:10000 в 0,9

% растворе натрия хлорида с 2

раствором

сыворотки крови

плодов коровы, жидкой, инактивированной при температуре

56 +1

С в тече-

ние 30 мин

(для исключения возможности присутствия ингибиторов вируса

желтой лихорадки)

Каждое разведение в объёме 0,1 мл вносят в три флакона

вместимостью

100,0 мл с полностью сформировавшимся монослоем клеток

ФЭК

или в три лунки 6

ти или 12

ти луночных планшетов с

полностью

сформировавшимся монослоем культур клеток

Vero

или

PS.

Инфицированные клетки

во флаконах или планшетах помещают на 2

в термостат при температуре

37 +1

С. Через каждые 15

–

20 мин проводят

обкатывание

монослоя клеток вируссодержащей жидкостью путем пока-

чивания флаконов или планшетов. По истечении

периода адсорбции вируса в

каждый флакон

(

или лунку планшета

)

наносят

агаровое покрытие и инкуби-

руют (раздел «Подлинность

»).

Учёт результатов.

Определение титра вируса желтой лихорадки

про-

водят на 5 сут при титровании в культурах клеток ФЭК или

, и на 6

7 сут

при титровании в культуре клеток

Vero

Подсчитывают количество бляшек отдельно в каждом флаконе

(

лун-

ке

)

, после чего определяют среднее количество бляшек для каждого разведе-

ния вируса и определяют концентрацию вируса в одной прививочной дозе