воздушного мешка прорывают плоской полукруглой хирургической иглой.
Затем на отверстие, расположенное на боковой поверхности, вносят 0,1 мл
0,004 М стерильного ФЦБ
раствора Мак
-
Илвейна, подогретого до температу-
ры (50
±
5) °С, и той же иглой осторожно продавливают подскорлупную обо-
лочку. После этого практически вся капля раствора проходит под подскор-
лупную оболочку и частично отслаивает ХАО.
Из отверстия в центре воздушного мешка
резиновой грушей осторожно
отсасывают воздух до полного опускания ХАО и создания искусственного
воздушного мешка под боковой щелью. Для контроля наличия и величины
искусственного воздушного мешка вновь проводят овоскопию и бракуют эм-
брионы, имеющие кровоизлияния, воздушные мешки под ХАО или без ис-
кусственных воздушных мешков. Яйца с опущенной ХАО помещают на лот-
ки отверстием вверх и выдерживают 2 ч в термостате при температуре (37
±
1) °С. Затем проводят овоскопию повторно и бракуют эмбрионы с воздуш-
ными мешками под ХАО, без искусственных воздушных мешков и эмбрионы
с кровоизлияниями
.
Приготовление десятикратных разведений.
Для приготовления разве-
дений используют стерильный ФЦБ. Готовят
7
десятикратных разведений: в
штатив устанавливают 7 пробирок, которые маркируют от 10
-1
до 10
-7
. В
первую пробирку вносят 4 мл ФЦБ
.
В последующие
6
пробирок вносят по
4,5 мл ФЦБ. Вскрывают
2
ампулы с вакциной и растворяют их содержимое в
0,5 мл
ФЦБ, взятом из первой пробирки с маркировкой 10
-1
. Полученный
раствор из
2
ампул переносят пипеткой в пробирки с маркировкой 10
-1
. Этой
же пипеткой тщательно перемешивают раствор в пробирке и переносят 0,5
мл в пробирку с маркировкой 10
-2
, не касаясь пипеткой жидкости, после чего
меняют пипетку. Аналогичным образом готовят последующие разведения до
разведения 10
-7
, меняя пипетки после каждого разведения.
Постановка основного опыта.
Для заражения эмбрионов используют
разведения вакцины 10
-6
и 10
-7
. Каждое разведение вируса вводят на ХАО
6
куриных эмбрионов по 0,1
мл в отверстие на
боковой поверхности яйца. Кру-
Предыдущая < | 5465 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF