путем деления среднего (по
3
ампулам) количества живых м.к./мл на
10
10
м.к., составляющих
1
накожную прививочную дозу.
4.
Иммуногенность
.
Не менее 7 из 10 морских свинок, привитых под-
кожно дозой
2
∙
10
9
живых бруцелл в 1 мл, должны быть предохранены
от за-
ражения
2
минимальными заражающими дозами вирулентного штамма
B. melitensis
565.
Одна минимальная заражающая доза
B. melitensis
565 не
должна превышать 10 м.к.
Иммунизируют подкожно дозой 2
∙
10
9
живых м.к. в объеме 1 мл вак-
цины 10 морских свинок массой (350
±
50) г
любого пола. Через 28
–
30 сут
иммунизированных и 3 неиммунизированных
(контрольных) животных за-
ражают подкожно путем введения
2
инфицирующих доз вирулентного
штамма
B. melitensis
565
в объеме 1 мл. Параллельно проверяют количество
живых бруцеллезных бактерий
в дозе для заражения, делая высев
из разведе-
ния 10
-7
по 0,1 мл на 3 чашки Петри с эритрит
-
агаром или мясопептонным
агаром.
Через 6
–
7 сут инкубации посевов при температуре (37
±
1) ºС на
каждой чашке Петри должно вырасти не менее 2 колоний.
Иммунизированных и контрольных морских свинок через 28
–
30 сут
подвергают эвтаназии
и вскрывают. Печень, селезенку, лимфоузлы (паховые,
парааортальные, шейные) помещают в стерильную чашку Петри. Каждый
орган надсекают ножницами, берут уколом стерильной деревянной палочкой
и вносят в пробирку со скошенным печеночным агаром или агаром Альбими,
тщательно втирая материал в поверхность агара. Затем посевной материал
вносят в пробирки с эритрит
-
бульоном.
Для посева каждого органа исполь-
зуют
отдельную палочку.
Выросшие
колонии бруцелл
петлей высевают на среды с анилиновыми
красками. Через 7 сут инкубации посевов при температуре (37
± 1)
о
С выде-
ленные культуры дифференцируют по редуцирующей способности бруцелл к
анилиновым краскам и образованию сероводорода.
B. abortus
растет только
на средах с фуксином,
B. melitensis
–
в присутствии фуксина и тионина.
Предыдущая < | 5261 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF