Фармакопея | pharmacopeia.ru | Том 4

белка колориметрическим методом (метод Лоури) в биологических лекар-
ственных препаратах»

Субстанцию предварительно растворяют в воде очи-

щенной

до концентрации 5,0 мг/мл.

Нуклеиновые кислоты

Не более

2,0 %.

Определение проводят

в со-

ответствии с

ОФС «Определение нуклеиновых кислот по методу Спирина

биологических лекарственных препаратах

».

Субстанцию предварительно

растворяют в воде очищенной

до концентрации 1,0 мг/мл.

ацетильные группы

Не менее 2,0 мкмоль/мг. Испытания проводят

в соответствии с

ОФС «Определение О

ацетильных групп

в полисахаридных

вакцинах

».

Субстанцию предварительно растворяют в воде очищенной до

концентрации 1,0 мг/мл

Молекулярные параметры

Не менее 50 % полисахарида должно

элюироваться в объеме до

коэффициента распределения

= 0,25.

Опреде-

ление проводят методом гель

фильтрации с использованием

сефарозы

Через

колонку длиной около

0,4 м,

с внутренним диаметром 9 мм, уравновешенную

0,2

раствором натрия хлорида пропускают около 0,9 мг полисахарида в

объеме 0,5 мл и элюируют со скоростью

около 14 мл/ч. Фракции регистри-

руют с помощью

ультрафиолетового

детектора при

длине волны 206 нм. Вы-

ход полисахарида оценивают по площади пиков до и после К

= 0,25.

Калибрование колонки

. Определяют полный

(

) и свободный

(

) объ-

емы

колонки с помощью

калибровочных

растворов

голубого

декстрана

натрия азида

в условиях, описанных выше.

Вычисляют

объем выхода фракций в мл (

)

, соответствующий

0,25 по формуле:

𝑉𝑉

𝑒𝑒

𝑉𝑉

+ 0,25(

𝑉𝑉

𝑡𝑡

− 𝑉𝑉

где

V0 –

свободный объем колонки (объем выхода голубого декстрана), мл;

Vt –

общий объем колонки (объем выхода натрия азида), мл;

0,25 –

коэффициент распределения вещества (К

d).

Рассчитывают

значение объема выхода (

)

в мм по формуле и нахо-

дят

на хроматограмме