𝑉𝑉
𝑒𝑒
=
𝑉𝑉
𝑒𝑒
(
мл
)
∙
𝑉𝑉
𝑡𝑡
(
мм
)
𝑉𝑉
𝑡𝑡
(
мл
)
.
Пики, элюирующиеся до и после
K
d
= 0,25 (значение
V
е
на
хромато-
грамме, мм), интегрируют вручную.
Содержание полисахарида
(А)
в процентах
в субстанции вакцины,
элюированного
до
Kd = 0,25,
вычисляют
по формуле:
𝐴𝐴
=
𝑆𝑆
1
(
𝑆𝑆
1
+
𝑆𝑆
2
)
∙
100 %,
где
:
S
1
–
площадь пика, элюировавшегося до К
d = 0,25;
S
2
–
суммарная площадь пиков, элюировавшихся
до и после К
d
= 0,25.
Определение молекулярных параметров можно проводить с помощью
валидированного метода эксклюзионной
высокоэффективной жидкостной
хроматографии (ВЭЖХ) в соответствии с ОФС «Высокоэффективная жид-
костная хроматография» раздел «Эксклюзионная хроматография».
Примечания
1.
Приготовление испытуемого
раствора
.
Растворяют
0,9 ±
0,050 мг
полисахарида в 0,5 мл
0,2
М раствора натрия хлорида. Полученный
раствор
перемешивают на шейкере в течение 2 мин. Раствор готовят непосредственно
перед использованием.
2.
Приготовление 0,
1
% раствора
натрия азида
.
Растворяют
1 мг
натрия азида в 1мл 0,2М раствора натрия хлорида. Раствор
перемешивают
на
шейкере в течение 1 мин.
Раствор готовят непосредственно перед использо-
ванием.
3.
Приготовление 0,5
% раствора голубого декстрана.
Растворяют
0,5
мг голубого декстрана в 0,5 мл 0,2
М раствора натрия хлорида
,
переме-
шивают на шейкере в течение 1 мин
,
прибавляют 40 мкл 0,1
%
раствора
натрия азида и снова
перемешивают
на шейкере.
Растворы
для калибрования
хроматографической колонки готовят
непосредственно перед использованием.
4.
Приготовление
0,2
М раствора
натрия хлорида
.
В мерную колбу
вместимостью 1000 мл
помещают 500
мл воды
очищенной, прибавляют 11,7
г
натрия хлорида
,
доводят объём раствора водой до метки
.
Раствор переме-
шивают на магнитной мешалке в течение 5 мин и
хранят при температуре 4
–
8 °
С
в течение
1 мес.
Специфическая активность
.
Содержание Ви
-
антигена в субстанции
должно быть от 70 до 130 %. Испытания проводят
методом ракетного имму-
Предыдущая < | 5267 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF