отсутствии торможения с сывороткой диагностической к шигеллам Флексне-
ра неадсорбированной в концентрации менее 25 мкг/мл. Оценивается в реак-
ции торможения
пассивной гемагглютинации (РТПГА).
Ингредиенты для проведения РТПГА: сыворотки диагностические к
шигеллам Зонне и Флекснера неадсорбированные, диагностикум эритроци-
тарный шигеллезный Зонне и Флекснера антигенный, испытуемая серия вак-
цины Шигеллвак, стандартный образец (СО
)
содержания ПС
.
Определение рабочего разведения шигеллезных диагностических сыво-
роток.
Рабочее разведение определяют в реакции пассивной гемагглютина-
ции. Для постановки реакции готовят двукратные разведения сывороток в 0,9
% растворе натрия хлорида в объеме 100 мкл, начиная с разведения сыворо-
ток 1:10
,
в полистироловых круглодонных планшетах. В каждую из лунок
прибавляют по 25 мкл соответствующего диагностикума. Планшеты встря-
хивают и оставляют на 1,5
–
2 ч при комнатной температуре.
Контролями являются:
1) проверка отсутствия спонтанной агглютинации диагностикума
.
В
2
лунки, содержащие по 50 мкл 0,9 % раствора натрия хлорида, прибавляют по
25 мкл диагностикума;
2) проверка на отсутствие в испытуемой сыворотке агглютининов к
эритроцитам барана
.
В
2 лунки планшета вносят по 50 мкл сыворотки в раз-
ведении 1:10 и прибавляют по 25 мкл 1 % взвеси несенсибилизированных
формалинизированных эритроцитов барана (контрольные эритроциты).
Учет реакции производится по
«
четырехкрестовой
»
системе. Титром
антител испытуемой сыворотки считается последнее разведение сыворотки,
при котором наблюдается агглютинация эритроцитов интенсивностью не ме-
нее чем на 3+ (+++), когда
агглютинированы почти все эритроциты, и на их
фоне определяется малозаметное кольцо из осевших неагглютинированных
эритроцитов («зонтик
»)
.
Рабочее разведение сыворотки для последующего использования в
РТПГА берут на
4
разведения концентрированнее, чем исследуемый титр.
Предыдущая < | 5280 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF