background image

отсутствии торможения с сывороткой диагностической к шигеллам Флексне-
ра неадсорбированной в концентрации менее 25 мкг/мл. Оценивается в реак-
ции торможения

 

пассивной гемагглютинации (РТПГА).

 

Ингредиенты  для  проведения  РТПГА:  сыворотки  диагностические  к 

шигеллам  Зонне  и  Флекснера  неадсорбированные,  диагностикум  эритроци-
тарный шигеллезный Зонне и Флекснера антигенный, испытуемая серия вак-
цины Шигеллвак, стандартный образец (СО

содержания ПС

Определение рабочего разведения шигеллезных диагностических сыво-

роток. 

Рабочее разведение определяют в реакции пассивной гемагглютина-

ции. Для постановки реакции готовят двукратные разведения сывороток в 0,9 
% растворе натрия хлорида в объеме 100 мкл, начиная с разведения сыворо-
ток  1:10

в  полистироловых  круглодонных  планшетах.  В  каждую  из  лунок 

прибавляют  по  25  мкл  соответствующего  диагностикума.  Планшеты  встря-
хивают и оставляют на 1,5

 – 

2 ч при комнатной температуре. 

 

Контролями являются:

 

1) проверка отсутствия спонтанной агглютинации диагностикума

В

  2 

лунки, содержащие по 50 мкл 0,9 % раствора натрия хлорида, прибавляют по 
25 мкл диагностикума;

 

2)  проверка  на  отсутствие  в  испытуемой  сыворотке  агглютининов  к 

эритроцитам барана

В

 

2 лунки планшета вносят по 50 мкл сыворотки в раз-

ведении  1:10  и  прибавляют  по  25  мкл  1  %  взвеси  несенсибилизированных 
формалинизированных эритроцитов барана (контрольные эритроциты). 

 

Учет  реакции  производится  по 

«

четырехкрестовой

» 

системе.  Титром 

антител испытуемой сыворотки считается последнее разведение сыворотки, 
при котором наблюдается агглютинация эритроцитов интенсивностью не ме-
нее чем на 3+ (+++), когда

 

агглютинированы почти все эритроциты, и на их 

фоне  определяется  малозаметное  кольцо  из  осевших  неагглютинированных 
эритроцитов («зонтик

»)

.

 

Рабочее  разведение  сыворотки  для  последующего  использования  в 

РТПГА берут на 

разведения концентрированнее, чем исследуемый титр.

 

Предыдущая <  | 5280  | > Следующая  | Главная  | pharma-14@mail.ru |  pharmacopeia.ru | Скачать в PDF