внутримышечно вводят по 1 млн клеток исследуемой клеточной культуры.
Контрольной группе мышей (30 животных) вводят по 1 млн заведомо
туморогенных клеток (например, линии HeLa). Мышей содержат в
специализированном кондиционированном виварии.
За животными опытной и контрольной групп наблюдают в течение 21
сут. Животных обследуют ежедневно путем пальпации места инокуляции
клеток и лимфатических узлов (регионарных, аксиллярных и подколенных).
Оценивают общее состояние мышей и отдельно фиксируют гибель
животных, связанную с наличием иммунодефицита и появление опухолевого
роста. Образовавшиеся узлы измеряют штангенциркулем (в мм) и вычисляют
объем V
ср
.по формуле:
V
ср
= а ∙ в ∙ с,
где: а – длина, в – ширина, с - высота опухоли
После окончания срока наблюдения проводят эвтаназию животных и
при макроскопическом исследовании определяют наличие узлов в месте
введения клеток, в лимфатических узлах, легких, почках, печени и селезенке.
Все поражения, напоминающие опухоли, а также лимфатические узлы и
органы всех животных исследуют гистологически.
Если изучаемые клетки являются заведомо туморогенными, следует
определить уровень их туморогенности, основанный на расчете значения
50% туморопродуцирующей дозы (ТПД
50
). Для расчета ТПД
50
изучаемые
клетки вводят экспериментальным животным в дозах 10
7
; 10
5
; 10
3
и 10
1
и
данные выражают как 50 % доза опухолеобразования (ДОО
50
).
Изучение туморогенности в системе in vitro методом инвазивности
в органные культуры
Метод основан на внесении испытуемых клеток в органную культуру
кожи куриного эмбриона и состоит из нескольких этапов:
–
приготовление эмбрионального экстракта из мышечной ткани 7 сут
куриных эмбрионов;
Предыдущая < | 2847 | > Следующая | Главная | pharma-14@mail.ru | pharmacopeia.ru | Скачать в PDF